Antiproliferativni učinak je

Napajanje

Kada se infekcija javlja u ljudskom tijelu, imunološke reakcije se razvijaju s kompleksnim staničnim interakcijama. Regulatori tih interakcija su posebne molekule proteina - citokini. Do danas je proučeno više od 200 različitih signalnih molekula. Njihova je osobitost da oni sami ne mogu utjecati na strane antigene i služe isključivo za prijenos podataka iz jedne stanice u drugu. Bez uključivanja citokina, nemoguće je razviti normalan imuni odgovor. Jedan od ključnih citokina je interferon.

Postoje tri vrste interferona: interferon-alfa (INF-a), interferon-beta (INF-β), interferon-gamma (INF-γ). Svi interferoni imaju antivirusni, imunomodulatorni, antitumorski i antiproliferativni učinak. Uz opća svojstva, interferoni imaju niz razlika.

IFN-α i IFN-β su međusobno slični. Njihovi su geni lokalizirani u kromosomu 9. Za generiranje signala induciraju se i virusi. Imaju izražen antivirusni i antitumorski učinak, a manje imunomodulirajuća svojstva. Glavne proizvođačke stanice za INF-a su makrofagi, za IFN-β - epitelnih stanica, fibroblasta.

IFN-γ ima izražen imunomodulatorni učinak, zajedno s interleukin-2 (IL-2) i faktorom tumorske nekroze (TNF ili TNF) se odnosi na glavni pro-upalni citokin, je induktor staničnog imuniteta. Antivirusna i antitumorska svojstva su manje izražena nego u IFN-α i IFN-β. gen IFN-γ nalazi se u 12 kromosomu, glavne stanice proizvođača su T-limfociti, prirodni ili prirodni ubojice (NK-stanice). Signal induciranja za proizvodnju može biti bilo koji antigen ili drugi citokini.

Antivirusno djelovanje interferona je suzbijanje sinteze virusne RNA, suzbijanje sinteze proteinske omotnice virusa. Mehanizam tog učinka je aktivacija unutarstaničnih enzima, kao što je protein kinaza ili adenilat sintetaza. Protein kinaza uništava faktor inicijacije sinteze proteina matričnom RNA, koja suprimira sintezu proteina. Adenilat sintetaza - uzrokuje sintezu tvari koje uništavaju virusnu RNA.

Imunomodulacijski učinak interferona - sposobnost reguliranja interakcije stanica uključenih u imuni odgovor. Interferoni ovu funkciju podešavanjem osjetljivost stanica na ekspresiju citokina i na staničnim membranama molekulama histokompatibilnog kompleksa tipa I (GKG1). Jačanje GKG1 izraz stanica inficiranih virusom značajno povećava vjerojatnost da će biti prepoznat od strane imunoloških stanica iz tijela i eleminirovany. Najizraženijih imunomodulatorni je IFN-y, kao produkt T-limfocita pomagača I unositi zajedno s drugim proupalni citokini aktiviraju makrofage, T-citotoksični limfociti, prirodne stanice ubojice (NK-stanice), inhibiraju aktivnost B-limfocita aktivira prostaglandin i kortikosteroidni sustav. Svi ti čimbenici poboljšati fagocita koji i citotoksično odgovor na upalne zone fokusa i pridonosi učinkovitom uklanjanju infektivni agens.

Antitumorski učinak interferona povezana je s njihovom sposobnošću usporavanja ili suzbijanja rasta stanične kulture i aktivacije antitumorskih mehanizama imunološkog sustava. Ova svojstva interferona otkrivena je davno i široko se koriste u terapeutske svrhe. Svi antitumorski učinci interferona podijeljeni su u izravnu i neizravnu. Ravne linije povezane su s mogućnošću izravnog utjecaja na tumorske stanice, njihov rast i diferencijaciju. Neizravni su povezani s poboljšanjem sposobnosti imunokompetentnih stanica za otkrivanje i uništavanje atipičnih stanica u tijelu.

Izravni antitumorski učinci interferona:

  • Suzbijanje sinteze RNA.
  • Suzbijanje sinteze proteina.
  • Poticanje nediferenciranih stanica do sazrijevanja.
  • Povećana ekspresija membranskih antigena tumorskih stanica i hormonskih receptora.
  • Kršenje procesa vazogeneze.
  • Neutralizacija onkovovida.
  • Suzbijanje učinka čimbenika rasta tumora.

Neizravni antitumorski učinci interferona:

  • Stimulacija aktivnosti stanica imunološkog sustava (makrofagi, NK stanice, T-citotoksični limfociti).
  • Povećanje ekspresije na stanicama histokompatibilnih molekula prvog razreda.

Antiproliferativni učinak interferona je sposobnost interferona pokazati svojstva citostatička - za inhibiciju rasta stanica od suzbijanju sintezu RNA i proteina, kao i inhibiciju faktora rasta stimuliraju staničnu proliferaciju.

Glukokortikoidi (antiproliferativni učinak)

Antiproliferativno Učinci glukokortikoida su povezani s ograničenim kontakt s monocita u upale, te inhibicije srcu dijele fibroblaste oba hormona, kao i smanjiti njihov stimulacijski učinak na histamin, serotonin, kinina, čija tvorba smanjuje spomenutog steroida.

Osim toga, glukokortikoidi inhibiraju sintezu mukopolisaharida i time ograničiti vode vezanja tkiva i plazme Br uvala uhvaćen zajedno sa eksudatom u srcu reumatoidnog upale. To smanjuje oticanje, te što je najvažnije, razvoja reumatoidnog upale fibrinoid fazu i zatim hyalinosis.

Kao rezultat toga, spriječiti ili znatno smanjiti poremećaje u strukturi srčanih zalistaka, srčani mišić, krvne žile i tako dalje. Najviše se razvija dobar učinak kada se koristi zajedno s kortikosteroidima nesteroidni protuupalni lijekovi.

Koriste se glukokortikoidi i nadoknaditi njihov nedostatak u tijelu, te za regulatorni utjecaj na oštećene funkcije.

Kako bi se ispravak nedostatka glukokortikoidni hormoni kad se koristi kao primarni adrenalne insuficijencije (Addison-ova bolest, krvarenje u bubrežnoj kori sepse, ozljede rođenja, hipoksija), naznačen time, insuficijenciju i gluko i mineralokortikoida i na sekundarna adrenalna insuficijencija (hipopituitarizam, hipotalamusa sustava inhibicija - hipofiza - kore zbog produljene upotrebe glukokortikoida), karakteriziran nedostatkom samo glukokortikoida.

"Pedijatrijska farmakologija", IVMarkova

Kortikosteroidi svaki drugi dan može spriječiti ili smanjiti inhibicije hipotalamusu - hipofiza - nadbubrežna korteks i potiskivanje nespecifične otpornosti na infekcije. J. Melby (1977) navodi one indikacije u kojima glukokortikoidi mogu biti propisani u većini bolesnika svaki drugi dan, kao i bolesti u kojima je to nemoguće. Svakog dana možete primjenjivati ​​glukokortikoide sa sljedećim bolestima: bronhijalna...

Kod postavljanja kortikosteroida u slučajevima koji ne zahtijevaju hitnu terapiju preporučuje se uzeti u obzir dnevni ritam lučenja endogenih hormona nadbubrežne kore. Rano liječenje najviše (obično 2/3) doze treba primijeniti u jutarnjim satima u 7 - 8, ostalo - u popodnevnim satima na 13 - 14. Kada dijeljenjem dnevna doza daje tri doze 7, 10...

Prirodni mineralokortikoid, aldosteron, proizvodi glomerularni korteks adrenalnog korteksa; Ovaj proces regulira angiotenzin II, koji nastaje pod utjecajem renina. Kao lijekovi koriste se deoksikortikosteronski acetat (DOXA) i DOX-trimetil acetat. Upozorenja za uporabu. Nanesite mineralokortikoide u crijevnu toksikozu u kombinaciji s infuzijskom terapijom. Oni se također koriste za akutnu hipotenziju povezanu s gubitkom natrija i vode (ali...

Indikacije za dugotrajno davanje visokih doza glukokortikoida. Oni se koriste za nekoliko tjedana ili čak mjeseci za liječenje autoimune hemolitičke anemije, trombocitopenija purpura, neki nefritis, ulcerozni kolitis, sarkoidoza, akutna leukemija, generalizirani Hodgkinove bolesti, ne-reumatskih karditis, ponekad jake astme. U većini slučajeva, terapijski učinak ovisi o suzbijanju citoliza reakcija, posebno alergijske geneze....

Anabolički steroidi: methandrostenolone (dianabol, Nerobolum) metilandrostendiol (Methandriol) fenobolin (Durabolin, Nerobolum) retabolil - tvar proizvedena syn tezu muških spolnih hormona (androgeni). Androgeni su dane dvije različite učinke: androgeni (tj.. poticanja razvoja sekundarnih spolnih karakteristika) i anaboličko. Anabolički steroidi se razlikuju od strukture androgena i njihove androgeni svojstva znatno smanjila (100 ili više)....

Antiproliferativni lijekovi - Popis lijekova i lijekova

Opis farmakološkog djelovanja

Antiproliferativni učinak ima za cilj suzbijanje pretjerane proliferacije različitih stanica. Mehanizam djelovanja je drukčiji i ovisi o specifičnoj pripremi i tipu stanica na koje se ta akcija usmjerava. Konkretno, mehanizam ove akcije može se povezati s odredbom modulacijskog učinka na sintezu određenih onkogena, što dovodi do normalizacije neoplastične transformacije stanica i inhibicije rasta tumora. Ili mehanizam djelovanja može se temeljiti na inhibiranju proliferacije fibroblasta, stimuliranih glavnim faktorom rasta fibroblasta. Lijekovi koji imaju antiproliferativni učinak koriste se u liječenju i prevenciji raznih vrsta raka, adenoma prostate, različitih kroničnih bolesti kože (npr. Psorijaze).

Pretraga droga

Pripravci s farmakološkim djelovanjem "Antiproliferativni"

  • Avonex (liofilizat za otopinu za injekcije)
  • Avonex (otopina za intramuskularnu injekciju)
  • Adenostop (koncentrat za otopinu za oralnu primjenu)
  • Altevir (otopina za ubrizgavanje)
  • Alfaferon (otopina za injekcije)
  • Arava (Oralne tablete)
  • B
  • Beloderm (krema za vanjsku upotrebu)
  • Beloderm (mast za vanjsku upotrebu)
  • D
  • Genferon (rektalni supozitorije)
  • Genferon Light (Spray nasal)
  • D
  • Dilatrend (oralne tablete)
  • L
  • Leflunomid (supstanca-prašak)
  • Leflunomide (tablete su oralno)
  • P
  • Permixon (kapsula)
  • P
  • Realdiron (liofilizat za pripremu otopine za subkutanu administraciju)
  • Ronbetal (otopina za subkutanu administraciju)
  • T
  • Tadenan (kapsula)
  • Tyqveol (ulje za oralnu primjenu)
  • Tyqveol (rektalni supozitorije)
  • Tyqveol (kapsula)

Pažnja molim te! Informacije navedene u ovom priručniku za lijekove namijenjene su medicinskim stručnjacima i ne bi trebale predstavljati osnovu za samo-lijekove. Opisi lijekova su predviđeni za referencu i nisu namijenjeni za propisivanje liječenja bez uključivanja liječnika. Postoje kontraindikacije. Pacijenti trebaju specijalističke savjete!

Ako ste zainteresirani za bilo koji više protu-proliferacijskih sredstava i lijekovima, njihovim opisima i uputama za uporabu, sinonima i analoga, informacije o sastavu i obliku izdanju, indikacije i nuspojave, metode korištenja, doziranje i kontraindikacijama, primjećuje se na liječenju dječje medicine novorođenčadi i trudnice, cijenu i recenzije o lijekovima ili imate bilo kakva druga pitanja i prijedloge - pišite nam, svakako ćemo vam pokušati pomoći.

antiproliferativni

Antiproliferativni učinak ima za cilj suzbijanje pretjerane proliferacije različitih stanica.

Mehanizam djelovanja je drukčiji i ovisi o specifičnoj pripremi i tipu stanica na koje se ta akcija usmjerava. Konkretno, mehanizam ove akcije može se povezati s odredbom modulacijskog učinka na sintezu određenih onkogena, što dovodi do normalizacije neoplastične transformacije stanica i inhibicije rasta tumora. Ili mehanizam djelovanja može se temeljiti na inhibiranju proliferacije fibroblasta, stimuliranih glavnim faktorom rasta fibroblasta.

Lijekovi koji imaju antiproliferativni učinak koriste se u liječenju i prevenciji raznih vrsta raka, adenoma prostate, različitih kroničnih bolesti kože (npr. Psorijaze).

Antiproliferativno sredstvo

Izum se odnosi na farmaceutsku industriju, naročito na prirodni agens koji ima antiproliferativno djelovanje. Znači da antiproliferativno djelovanje, što je protein ekstrakt Toxocara canis, dobivenog ekstrakcijom gomogentata helmintima T. Canis fosfatno puferiranoj fiziološkoj otopini pri pH 7.2 u omjeru 1:10 za 36-48 sati na 4 ° C, centrifugiranjem. Gore opisano sredstvo ima izrazitu antiproliferativnu aktivnost. 1 z.s. f-ly, 1 tabl., 2 pr.

Izum se odnosi na područje medicine i veterinarske medicine, naročito na novo sredstvo prirodnog podrijetla, koje ima antiproliferativni učinak.

Moderna medicina ima prilično opsežan arsenal lijekova za tumore kemoterapije. Osnovi kemoterapija znači skupine, koje predstavlja antineoplastičnih antimetaboliti, antibiotici protiv raka, antikancerogena hormonska sredstva, imunomodulatori, i nekih drugih s različitim mehanizmom djelovanja. Većina tih antitumorskih lijekova vrlo su toksični, pa su stoga režimi i trajanje kemoterapije odabrani uzimajući u obzir manifestaciju nuspojava, što utječe na učinkovitost liječenja općenito.

Poznati prirodni lijekovi protiv raka biljnog porijekla (vinka alkaloidi (vinblastin, vinkristin), alkaloide (tisa taksani (paklitaksel), docetaksel), podofilotoksin izdvojeno iz podofilla štitnjače (etopozid, tenipozid) i alkaloidi Colchicum speciosum (demekoltsin (kolhamin), kolhicin )) i bakterijskog podrijetla (rubromitsin et al.), koji su također ograničena upotreba zbog visoke toksičnosti i uskog terapijskog spektra (liječenje određene raznovidnos s tumora, ponajprije s exophytic rastu).

Stoga postoji potreba za novim, visoko učinkovitim antitumorskim lijekovima prirodnog podrijetla, koji bi imali širok spektar djelovanja i bili bi manje toksični.

Helikopteri su zajednički naziv za parazitske crve koji žive u ljudskom tijelu, drugim životinjama i biljkama koje uzrokuju helmintije.

Pelmeni uključuju predstavnike tapeworms, ili cestodes, trematodes ili trematodes (obje ove skupine pripadaju flatworms) i roundworms, ili nematode.

Potonji uključuju Toksokary (posebno Toxocara canis). T. canis predstavlja nematoda koja parazitsizira crijevne zvijeri, na primjer pse; Invazija poznata kao toksokaraza.

Tijekom parazitizma, helminti proizvode i oslobađaju različite metaboličke proizvode. Izlučujući proizvodi iz vitalne aktivnosti helminti su za organizam domaćina neprirodne tvari u svojim fiziološkim procesima.

Poznato je da su uzročnici invasions mogu imati modulatora utjecaj na tijek mnogih bolesti vrlo različite etiologije, uključujući malignu (npr Vasilev S. i dr. (2015). Posebno, pokazano je da su miševi zaražene nematoda Trichinella spiralis ( reprodukcije trihinoza) dovodi do supresije rasta malignih stanica i povećavaju preživljavanje životinja nakon inokulacije stanica melanoma B-16 u uvjetima in vivo (Molinari i, Ebersole JL, 1977, Pocock D., Meerovitch E., 1982; Kang IL et al, 2013. ) Postoje i podaci o ispitivanju produkata metabolizma T. spira LIS s inhibicijskim učinkom na rast i preživljavanje tumorskih stanica u uvjetima in vitro (Vasileva S. et al, 2015 ;. Wang X.L. et al, 2009 ;. Wang X.L. sur, 2013).

Istraživanja o procjeni antitumorske aktivnosti T. canis ili produkata metabolizma ovih bjelančevina nisu prethodno provedena.

Cilj izuma je osigurati ekstrakte proteina iz T. canis tkiva, kako bi se procijenili njihovi antiproliferativni učinci na modele tumorskih stanica različitih linija i kako bi se osigurala njihova moguća primjena u budućnosti kao učinkovit antitumorski agens.

Sažetak izuma sastoji se u tome da sredstvo koje ima antiproliferativno djelovanje je proteinski ekstrakt helmintih, posebno ekstrakta Toxocara canis. Treba naglasiti da su uvjeti za dobivanje ekstrakta Homogenat helmintima, uključujući T. canis, ovisi o biološki materijal, a bitne značajke dobivanje proteinskog ekstrakta je ekstrakcija s fosfatnom puferskom slanom pH = 7.2.

Ekstrakt ima izražen antiproliferativni i citostatički učinak na modele ljudskih tumorskih stanica in vitro. Kao što je već gore spomenuto, toksokarni ekstrakt nije prethodno testiran u modelima humanih tumorskih stanica in vitro.

Zbog prirodnog podrijetla, predloženi antiproliferativni agens može biti manje toksičan u prisutnosti visoke antitumorske učinkovitosti širokog spektra djelovanja.

Primjeri specifičnih izvedbi

PRIMJER 1 Priprava proteinskog ekstrakta T. canis.

Kao pretpostavljena antiproliferativna aktivnost, upotrijebljen je proteinski ekstrakt iz zrele T. canis, prethodno pročišćen iz spojeva niske molekulske mase.

Temeljito ispere s destiliranom vodom, a zatim sa fiziološkom smrznutih zrelih crva - Toxocara canis se raspala škare, homogenizacija u tarioniku porculana, smještena u posudu s ledom. Tijekom homogeniziranja, dobivena biomaterial se ponovi (3-5 puta), zamrzavanje i otapanje s istovremenim mljevenjem za potpuno uništenje strukture sirovine da se dobije homogena masa. Ekstrakcijom proteini iz T. canis dobiven Homogenat se koristi fosfatnom puferu pH 7,2, koji je dobiven prema receptu (natrijev klorid - 8,5 g dvobaznog natrijevog fosfat - 1,15 g kalij dihidrogen fosfat 0 -, 2 g u 1 litre destilirane vode) u omjeru 1:10. Ekstrakcija je provedena u rashladnom odjeljku na + 4 ° C kroz 48 sati uz stalno miješanje na magnetskoj miješalici. Nakon vremena ekstrakcije biomaterial dobiven centrifugira na 15.000 okretaja / min tijekom 20 minuta u centrifugi hladi Optima TLX (tabletop centrifugi kontrolira mikroprocesor Becman Coulter Herneshal, S.A.). Ekstrakt rezultirajući protein nakon centrifugiranja T. canis oslobođen proteina niske molekularne težine dijalizom fosfatnoj puferskoj fiziološkoj otopini, razrijedi se s destiliranom vodom u omjeru 1:10.

Dobiveni protein ekstrakt je pohranjen na -20 ° C. Koristeći metodu elektroforeze na poliakrilamidnom gelu, utvrđeno je da proteinski ekstrakt iz T. canis sadrži više od 20 proteinske frakcije različite elektroforetske mobilnosti i molekularne težine.

Primjer 2. Procjena učinka proteinskog ekstrakta T. canis na kulture ljudskih stanica dojke (MCF-7) i ljudskog debelog crijeva (Caco-2), ovisno o koncentraciji ekstrakta.

Svrha ovog pokusa bila je procijeniti učinak proteinskog ekstrakta T. canis na proliferaciju ljudskih tumorskih stanica u dva reda.

Materijali i metode

Ciljane stanice. MCF-7 (humani adenokarcinom grudi) i Caco-2 (humani adenokarcinom debelog crijeva): U dva epitelnih staničnih linija se koriste. Stanice, izvan perioda postavljanja pokusa, pohranjene su u tekućem dušiku. Prije studije Ampule stanica su odmrznute i kultivirane prema standardnim metodama iz tikvica za kulturu (Corning, tikvici, 25 cm2, USA) u mediju za uzgoj DMEM Glutamax (Gibco) uz dodatak 10% FBS i antibiotik / antimikotik (Gibco, x 100) uvjeti visoke vlažnosti2-inkubator (New Brunswick, Galaxy 170R) kod T = 37 ° C u atmosferi od 5% CO2.

Ekstrakt test proteina. Istraženi proteinski ekstrakt T. canis (pripravak vidjeti u primjeru 1) je ekstrakt u fosfatno puferiranoj fiziološkoj otopini, a ne sterilni. Koncentracija proteina u zalojskoj otopini bila je 10,9 mg / ml. Prije istraživanja, otopina je pohranjena na -70 ° C

Prije rada, cijev s proteinskim ekstraktom je odmrznuta na sobnoj temperaturi. U pokusu in vitro, ekstrakt bjelančevina testiran je na slijedećim koncentracijama proteina: 12,5, 25, 50, 100, 250, 500, 1 i 2 mg / ml. Da bi se pripremile razrijeđenja, korišten je medij za rast DMEM GlutaMAX (DGIBCO) s 2% FBS i antibiotikom.

Prije eksperimenta se dobiva radnu otopinu s koncentracijom od 2 mg / ml, poslije sterilizacija kroz Millipore mape-mlaznice (0,22 J.!) Dobije se razrjeđivanjem ekstrakta T. canis: 1, 500, 250, 100, 50, 25 i 12,5 μg / ml koristeći DMEM GlutaMAX medij za rast (DGIBCO) s 2% FBS i antibiotikom.

Za pokus, MCF-7 stanice i Caco-2 inkubiraju prema standardnim postupcima, čime se dobiju subkonfluentnogo monosloj. U aktivni fazi rasta stanica monosloj raspršen sa tripsin / versen, dobivene stanice su resuspendirane u mediju za rast (Gibco DMEM Glutamax) sa 10% FBS i standardne koncentracije antibiotika. Svježe pripravljena suspenzija stanica stavljeno je u 24-jažica (Sarstedt, Njemačka) na 35 × 10 3 stanica po jažici za MCF-7 stanice i 30 × 10 3 stanica po jažici za Caco-2 stanica. Nakon toga, ploče su stavljene u CO2-inkubatorom tijekom 3 sata do potpunog širenja stanica. Zatim je iz jažica uklonjen medij s nepovezanim stanicama i medij za rast je stavljen u ispitne jažice s istraživanom koncentracijom supstance (u 4 replicata za svaku testiranu koncentraciju). Kao kontrola, ostavljene su četiri jažice sa stanicama koje su uzgojene u kompletnom mediju za uzgoj s 2% FBS bez ispitivane tvari. Krajnji volumen medija za rast u kontrolnim i ispitnim skupinama bio je 500 ul po jažici.

Eksperiment se izvodi dnevno svjetlo optičko promatranje stanica korištenjem Olympus CK 40 inverznog mikroskopa (Japan), ocjenjivanje prisutnost ili odsutnost promjene u morfologiji stanica u jažice za ispitivanje u odnosu na kontrolu. Proliferacijskih odgovora tumorskih stanica na djelovanju test ekstrakta T. canis ocjenjuje gustoću i životnu sposobnost monosloja formirana nakon 96 sata inkubacije stanice u prisutnosti ekstrakta testa.

Održivost stanica određena je standardnim postupkom za brojanje stanica u Goryaevovoj komori uz prethodno bojenje stanične suspenzije s otopinom tripan-plava. U tu svrhu, monosloj je bio raspršen otopinom tripsina / versene, stanice su resuspendirane u mediju za rast i rezultirajuća suspenzija stanica je obojena sa 0.4% tripan Blue otopinom (SIGMA). Nakon toga, stanice su prebrojane u Goryavevoj stanici. U tu svrhu, u svakoj jažici je izbrojan ukupni (ukupni) broj stanica i broj obojenih (nestabilnih) stanica.

% živih stanica (Ndobro) izračunata je formulom

gdje je Nt - ukupni (ukupni) broj stanica u bunaru;

Noko - broj bojenih (ne-održivih) stanica u jažici.

Učinak ispitivanog ekstrakta T. canis na proliferativnu aktivnost MCF-7 i Caco-2 tumorskih stanica procijenjen je nakon 96 sati, uspoređujući ukupni broj stanica u ispitnim jažicama s obzirom na kontrolu.

Tijekom pokusa se određuje učinak ispitnog ekstrakta T. canis pri koncentracijama naznačenim u epitelnim kulturama stanica tumora dojke (MCF-7) i ljudskog debelog crijeva (Caco-2) provodi se svakodnevno vizualnu kontrolu prirodi rasta i morfologiji rastućih kolonije stanica. Nakon 24 do 48 sati u svim eksperimentalnim jažice sa stanicama MCF-7 i Caco-2 gustoća kolonija je usporediv s kontrolom. Morfološke promjene nisu otkrivene. Detrit je bio potpuno odsutan.

Nakon 72 h u MCF-7 i Caco-2 stanicama u koncentraciji od 2 mg / ml, primijećeno je zamjetno odstupanje rasta. Uočeno je da je u eksperimentalnim jažicama na 2 mg / ml veličina kolonija bila manja nego u kontrolnoj skupini; Također, broj stanica s mitotičkim dijeljenjem znatno se smanjio na vidnom polju, ali nije zabilježen ni morfološke promjene. U jažicama s MCF-7 i Caco-2 stanicama na 1 i 500 ug / ml, opažena je blagi usporeni rast u usporedbi s kontrolom. U pokusnim jažicama s koncentracijom od 12,5, 25, 50 i 250 ug / ml, nisu pronađene razlike u usporedbi s kontrolnom skupinom K.

Nakon 96 sati uzgoja na MCF-7 stanice i Caco-2 pri koncentracijama od 2, 1 i 500 ug / ml u vidnom polju promatranog znatno manje proliferacije kolonije s manje stanica u usporedbi s kolonijama u kontrolnoj skupini stanica. Morfološke promjene zabilježene su u MCF-7 stanicama samo pri maksimalnoj koncentraciji od 2 mg / ml. U ovoj testnoj skupini vidljive jedna kolonija, koje su zabilježene u stanicama, bez jasnih i različite sklopove s gubitkom karakterističnim uzorkom. Smanjuje se broj stanica s mitotičkim dijeljenjem u vidnom polju. Na istom detritu u okolišu bio je odsutan.

Nakon završetka eksperimenta, nakon 96 h, stanice su tripsinizirane, rezultirajuća suspenzija stanica obojana je sa 0.4% otopinom tripan-plave boje i brojem stanica brojanih u Goryaevovoj komori. Rezultati brojanja stanica prikazani su u tablici 1.

Iz podataka prikazanih u Tablici 1, slijedi da proučavani ekstrakt T. canis nije značajno utjecao na broj održivih Caco-2 stanica nakon 96 h inkubacije. Tako, u koncentraciji od 2 1 i 500 ug / ml ljudskog debelog količine živih stanica sostavlyaelo 90.0, 88.5 i 88%, što se može usporediti s kontrolnim stanicama skupini gdje je održivost je 96%. Istovremeno, pri istim koncentracijskim vrijednostima, uočeno je značajno smanjenje ukupnog broja stanica u usporedbi s kontrolnom skupinom. Tako, ukupan broj Caco-2 stanica u kontrolnoj skupini nakon 96 sati kulturi je 116.7 × 10 3 stanica / jažici, te na 500, 1, i 2 mg / ml su vrijednosti 72,0 × 10 March, 63,3 × 10 3 i 65,9 x 10 3 stanica / jažici, respektivno. U koncentracijama ekstrakta od 12,5 do 250 ug / ml, ukupni broj stanica usporediv je s kontrolnom skupinom i kretao se od 94,0 x 10 3 do 106,0 x 10 3 stanica / jažici. Na temelju toga može se zaključiti da visoke koncentracije T. canis ekstrakta od 500 do 2 mg / ml inhibiraju proliferacijsku aktivnost Caco-2 tumorskih stanica.

Usporedbom rezultata dobivenih (tablica 1) o učinku ekstrakta T. canis na tumorskim stanicama kulture ljudskog raka dojke i ljudskog debelog crijeva se može pretpostaviti da MCF-7 stanice su osjetljivi na štetnog učinka ispitivane tvari. Prema tome, podaci u tablici 1, što je broj živih stanica MCF-7 postepeno smanjivala od 95,2% u minimalnoj dozi od 12,5 do 79,5%, na maksimumu od 2 mg / ml, u usporedbi s referentnom vrijednošću 96,8 %. Blagi inhibicijski učinak ekstrakta ispitivanog na stanične proliferacije MCF-7 stanice se pojavi već pri koncentraciji od 50 ug / ml, pri čemu je ukupni broj stanica iznosio 151,9 x 10 ožujka stanica / jažici, u usporedbi s referentnom vrijednošću 181,3 × ožujak 10 stanica / dobro. S povećanjem koncentracije 100 ug / ml i više inhibicijski učinak je poboljšana u odnosu na koncentraciju ekstrakta i dosegla maksimalnu vrijednost od 2 mg / ml, pri čemu se ukupan broj stanica manji za tri puta u usporedbi s kontrolom i bila je 60.0 × March 10 stanica / jažica.

Na temelju rezultata dobivenih u ovom radu možemo zaključiti sljedeće.

1. Istraženi ekstrakt T. canis ima izražen antiproliferativni učinak na MCF-7 stanice u koncentracijama od 100, 250, 500, 1 i 2 mg / ml, što se manifestira u 96 sati inkubacije.

2. Učinak ekstrakta na MCF-7 stanice ovisi o dozi.

3. Inhibitorni učinak ekstrakta T. canis na proliferativnu aktivnost Caco-2 stanične kulture manifestira se u manjoj mjeri pri višim koncentracijama od 500, 1 i 2 mg / ml.

4. Kultura stanica MCF-7 ima veću osjetljivost na antiproliferativni učinak T. canis ekstrakta u usporedbi s Caco-2 stanicama u in vitro modelu nakon 96 h kulture.

1. Kang Y.J., Jo Jo, Cho M.K. et al. Thrichinella spiralis infekcija, rast tumora i metastaza stanica B16-F10 melanoma, Vet. Parasitol. - 2013. - V. 196 (1-2). - P. 106-113.

Molinari J.A., Ebersole J.L. Antineoplastični učinci dugotrajne infekcije Trichinella spiralis na B-16 melanom // Int. Arch. Alergija Appl. Immunol. - 1977. - V. 55 (1-4). - P. 444-448.

3. Pocock, D., Meerovitch, E., Antineoplastički učinak trichineloze u singenskom mišjem modelu, Parasitology. - 1982. - V. 84 (Pt 3). - P. 463-473.

4. Vasilev S., Ilic N., Gruden-Movsesijan A. i sur. Nekroza i apoptoza u Trichinella spiralis-posredovanu smanjenje tumora // Cent. Eur. J. Immunology. - 2015. - V. 40 (1). P. 42-53.

5. Wang X.L., Fu B.Q., Yang S.J. et al. Trichinella spiralis - potencijalni antitumorski agent // Vet. Parasitol. - 2009. - V. 159 (3-4). - P. 249-252.

Wang X.L., Liu M.Y., Sun S.M. et al. Antitumorski protein koji proizvodi Trichinella spiralis inducira apoptozu kod humanih hepatoma H7402 stanica // Vet. Parasitol. - 2013. - V. 194 (2-4). - P. 186-188.

1. Sredstvo, imaju antiproliferativno djelovanje, što je protein ekstrakt Toxocara canis, dobivena ekstrakcijom gomogentata helmintima T. Canis fosfatno puferiranoj fiziološkoj otopini pri pH 7.2 u omjeru 1:10 za 36-48 sati na 4 ° C, i centrifugiranjem.

2. Sredstvo prema zahtjevu 1, naznačeno time, da ima antiproliferativnu aktivnost na modelu humanih tumorskih stanica in vitro.

Antiproliferativni učinak je

Neke funkcije su podložne antiproliferativno djelovanje interferona. Većina komponenata anti-infektivne aktivnosti interferona igraju jednu ili drugu ulogu u njihovom antitumorskom učinku.

Navedeno povećanje sinteza Mx proteina, inhibitori mRNA transkripcije enzima 2'-5'-oligoadenilat sintetaze sustava, za inhibiciju prevođenje potreban za sintezu staničnih proteina, triptofan iscrpljivanja unutarstaničnih skladišta, što dovodi do poremećaja sinteze proteina u stanici, su od velike važnosti u antiproliferativnom, uključujući antitumorsko, interferoni čin,

Vrijednost promjene razine 2'-5'-sintetaze u antiproliferativni učinak IFN-a potvrđeno kliničkim opažanjima: prikazana je povezanost stupnja povećanja enzimske razine s učinkovitosti terapije u bolesnika s crijevnim karcinoidima i limfomima.

Ne manje važno u antiproliferativnom učinku interferon je još jedan mehanizam. Signal koji se prenosi u jezgru stanice kao posljedica vezanja interferona na receptor interferona smanjuje ekspresiju proto-onkogena, posebice c-tus i c-fos, koji su uključeni u regulaciju staničnog rasta.

Suzbijanje ovih protooncogenes dovodi do blokade staničnog ciklusa, akumulacije stanica u fazi G0, kao posljedica čega se proliferacija usporava ili čak zaustavlja, jer većina stanica prolazi kroz apoptozu. Ovaj proces je reverzibilan, a nakon nekog vremena nakon uklanjanja interferonom stanične proliferacije može oporaviti tempo, izražaj onkogena, potisnuti u prisustvu interferona, nakon njegovog uklanjanja iz tijela moguće je vratiti se na prethodnu razinu.

Slično tome, djelovanje interferoni u većini slučajeva, ne uzrokuje nepovratne procese u stanicama čiji je genotip promijenjen integracijom genoma virusa u DNA stanice. Dugotrajna uporaba interferona u tim slučajevima može vratiti normalan fenotip stanica, ali prestanak djelovanja interferona opet vodi razvoju tumora.

Važno je antiproliferativni, naročito, antitumorske, interferoni djelovanje je inhibicija angiogeneze - rast i formiranje novih krvnih žila, igra važnu ulogu u rastu i metastaze tumora. Brojna istraživanja koja ispituju terapeutsku mehanizam djelovanja na IFN-a je pokazao da haemangiomatosis interferoni inhibiraju proliferaciju endotelnih stanica i stanice glatkih mišića, inhibiciju faktora rasta fibroblasta i angiogenin (vaskularni faktor rasta i neoplazme), smanjuju proizvodnju kolagena.

To se pokazuje IL-12, koji posjeduje izražen antiangiogeni učinak, pojačava stvaranje IFN-y i njegov efektor proteina p10.

Na staničnim kulturama zdravih donora i bolesnika s akutnom leukemijom pokazala je da IFN-a značajno suprimira aktivnost telomeraze - enzim koji regulira duljinu telomera, nužnu za podjelu stanica. Postoji nekoliko puta su potvrdili da podatke IFN-gama pojačava ekspresiju FAS-antigena i kaspaze 3 i tako inducira apoptozu u stanicama koštane srži (CD34 +) stanica.

To su primljeni podaci Slično, IFN-a, a učinak njegove apoptotske aktivnosti poboljšava fragmentacija anti-apoptotičke molekule Bax koju uzrokuje. IFN-a također povećava oslobađanje čimbenika tumorske nekroze u krv, čija je radnja usmjerena na degradaciju tumorskih stanica.

Dakle, od dosad dostupnih podataka jasno je da interferoni imaju antiproliferativne, uključujući antitumorske, učinke, ostvarene s nekoliko, često međusobno povezanih načina. Antitumorsko djelovanje interferona od značenja koja su navedena metoda izravne učinke na tumor i neizravnim mehanizmima antitumorskih povezani s povećanom aktivnošću makrofaga, aktivacija T stanica, prirodnih stanica ubojica i povećanu proizvodnju antitijela.

Antiproliferativni učinak je

Institut za epidemiologiju i mikrobiologiju. NF Gamalei RAMS, Moskva

Antiproliferativni učinak

Vrlo osjetljiva na tumorske stanice AP-učinke karakterizirane kontinuiranim nekontroliranim rastom, stoga AP učinak daje nadu antitumorskoj aktivnosti IFN. Mnogo je stotina istraživača proučavalo taj problem, često kombinirajući ova dva koncepta, što je klinički netočno.

Kod primjene IFN-a u visokim dozama (> 1 milijuna IU) AP-učinak se prvenstveno izražava u citopeniji. Stanice hematopoetskog sustava su vrlo osjetljive na IFN. Istodobno su potisnuti i rast i sposobnost kolonije u koštanoj srži i slezeni. Potisnut i reprodukcija limfocita stimuliranih mitogenima. U pravilu, limfoidna serija je osjetljivija na IFN od mikeloida. Najmanje zahvaćena eritropoezijem IFN.

Međutim, IFN se rabi u visokim dozama (3-15 dnevnih MIU), uzrokuje cytoreduction (smanjenje broja cirkulirajućih tumorskih leukocita) sa prosječno 9 do 97,4x10 4,2x10 9 / l sa smanjenjem veličine slezene [28] u bolesnika kronična mijelogena leukemija. Učinak je bio ovisan o primijenjenoj dozi lijeka (tj postignut na štetu AP-efekt), ali kako bi se postigla protutumorski učinak i ljekovita potrebi dodatne mjere, uključujući i transplantacije koštane srži.

AP efekt je reverzibilan. Nakon prestanka IFN-a, hematopoiesis je potpuno obnovljen. Rast tumorskih stanica također se obnavlja. Da bi se održao AP učinak u tijelu, neophodno je stalno davati visoke doze IFN-a.

AP djelovanje svakako je povezana s aktiviranjem 2”, 5'-oligo (A) sintetaze, kao što je u raznim kulturama preklapanja između sloja 2', 5'-oligoadenylates u citoplazmi i stupanj suzbijanja proliferacije. Taj je odnos još uvijek nejasan. Ne postavlja se sumnja da molekularni mehanizmi razvoja AB i AP stanja u sljedećim fazama izgledaju različiti. Na primjer, toksin kolere, promjenom fizičko-kemijski stanje citoplazmatske membrane i razine cAMP inhibira razvoj AB-stanja, ali ne i AP učinci [29]. Sličan učinak ima oubain, puromicin i cikloheksimid u određenim koncentracijama.

Stanice mišićno-koštanog, mezenhimalnog i epitelnog tkiva u tijelu obično su otporne na AP-djelovanje IFN-a. Najosjetljiviji model koji se koristi za mjerenje učinka AP je transformirani B-limfociti Daudi linije, izolirani od pacijenata s Burkittovim limfomom. U retrospektivnoj analizi, može se zaključiti da je najaktivniji antiproliferativni potencijal IFN-a. Često je 10-20 puta učinkovitiji od IFN-a. Aktivnost IFN- i IFN-varira ovisno o vrsti stanica, ali češće IFN-ima prednosti za stanice kožnog mišićnog tkiva. Na antiproliferativni potencijal, vrijedi sljedeća IFN serija: IFN-> IFN-> IFN-. U ovom slučaju treba imati na umu da je učinak AP zajednički svim IFN-om i uvijek se klinički očituje kada se koristi u visokim dozama. Budući da je klinički sindrom obično reverzibilna citopenija, poželjno je primijeniti IFN u dnevnim dozama> 1 milijun IU s hematopoetskim aktivatorima, na primjer s leukinferonom.

AP učinak se očituje samo kada IFN reagira sa specifičnim receptorima, nakon čega slijedi duboka kršenja sinteze makromolekula. Mutanti stanica koje su izgubile receptore dobivaju otpornost na antivirusno i antiproliferativno djelovanje. Treba također uzeti u obzir da je antiproliferativni učinak pri malim dozama citostatski: rast stanica je potpuno obnovljen nakon uklanjanja IFN-a, iako to zahtjeva vrijeme - najmanje 24 sata [30, 31].

Pregled brojnih opažanja [32] dopušta zaključiti da je antiproliferativni učinak IFN-a posebno izražen u razdoblju pripremnog jaza (faza G0, G1, G2), pa su stanice koje imaju kratko vrijeme i sinteza DNA (S-razdoblje) intenzivne, ili su u fazi mitoze (M-faza), manje su osjetljive.

Poznato je da postoji neka osnovna razina 2 ', 5'-oligoadenilata u citoplazmi potrebnoj za proliferaciju. Međutim, kada se IFN primjenjuje u većini tkiva, njihova razina može se povećati 10-15 puta. Tako, kod miševa koji su primili IFN / već nakon 2-5 sati počinje rasti stupanj 2”, 5'-oligoadenylates u slezene, pluća, jetre i u manjoj mjeri, timus i mozak [33]. Tako, na primjer, u Daudi stanica u citoplazmi, novi proteini s molekularnom težinom od 15, 16, 20, 53, 79, 87 i 105 kDa i smanjenu razinu samo jednog proteina - 23 kD. Kod otpornih AP-radnih mutantnih stanica iste linije, samo jedan protein - 15 kDa - očigledno nije induciran. Razina ostalih bjelančevina značajno je smanjena, ali se i dalje nalaze. Istovremeno, IFN [34] je također inhibirao ekspresiju staničnog proto-onkogena c-myc.

Sada je poznato da ljudski genom ima oko 40 staničnih proto-onkogena koji su izraženi samo u embrionalnim stanicama, ali manje aktivni u zrele. Prema objavljenim podacima, na primjer, Xenopus laevis tijekom oocita sazrijevanja u svakoj od njih akumulira do 8 milijuna kopija gena s-myc, u zrelim jajima fazi razini i dalje vrlo visoka - 5 milijuna jedinica, ali onda nakon oplodnje oni su raspoređeni u fisije i svaka tadpole stanica sadrži samo 20-50 kopija c-myc, tj. otprilike isto kao i za osobu.

U ljudskom genomu, c-myc u zrelim stanicama je malo izražen. Međutim, u embriogenezi, kao i kod kirurških operacija, javlja Regeneracija i popravak procese drugih geneza aktivacija s-myc onkogena rasta i druge c-ras i c-abl. Ovi protoonkogeni su apsolutno neophodni za pokretanje proliferacije. Aktivacija proto-onkogena rasta stimulira stanice da prelaze iz faze G0/ G1 do sljedećih faza staničnog ciklusa - S, G2 i mitoze (M). Međutim, rast tkiva je genetski određen i strogo kontroliran uz sudjelovanje faktora rasta, inhibicije kontakta, faktora apoptoze [22]. Glavni regulator rasta proto-onkogena je p53 protein, čiji je gen široko zastupljen u genomu sisavaca.

U stanicama hematopoetskog sustava, ekspresija gena p53 dovodi do fiziološkog fenomena - programirane smrtne apoptoze. Sprječava ovaj protein iz gena bcl-2. Tako, povećana ekspresija rasta protooncogenes stvara uvjete za rast i nekontrolirani malignosti (posebice točkaste mutacije, transformaciju protoonkogen u onkogen, ili kada je ugrađen u genom virusa i virusnih pojačivača učinka). Smanjenje njihove ekspresije pod utjecajem IFN ili p53 (sudjeluje i protein Rb, koji se ovdje ne smatra) suzbija rast i proliferaciju. Ali, naravno, ti procesi nisu ograničeni na, zapravo su mnogo složenije.

Kod tumorske transformacije, treba se pojaviti aktivacija c-myc i drugih onkogena rasta. Zanimljivo je da za održavanje transformirane fenotipske konstante ekspresije onkogena i rezultirajuće prisutnosti onkoproteina u citoplazmi su neophodni. Uvod u normalnu stanicu onkoproteina dovodi do pojave fenotipskih znakova transformacije, koji počinju nestajati dok se onkoproteini degradiraju. Uvođenje citoplazme transformiranih stanica protutijela na onkoproteine ​​također dovodi do privremenog oporavka fenotipski normalnih stanica. Dakle, transformirane stanice, koji je izgubio određene funkcije (diferencijacije), a karakteriziran nekontroliranim rastom, potiskivanje ekspresije onkogena rasta pod djelovanjem IFN može se vratiti u normalan fenotip. Izuzetno je važno poznavati svakog liječnika.

Postoji nekoliko načina za uključivanje stanične protoonkogena - točkaste mutacije, genomska pojačanje, nakupljanje transkripata ili konačno translokacija gena opisani za kronične mijeloične leukemije (c-abl 09:22 gen) ili Burkittov limfom (gen-myc 08:14) [35], Promijenjeni gen utječe na novi promotor i može se aktivirati. Može igrati važnu ulogu i onkogenih virusa koji nose ove onkogeni (obično uz manje izmjene), te ih moći ugraditi u genom. Međutim, nema sumnje da su najvjerojatnije točkaste mutacije u genu p53, koji se nalaze u najmanje 50% tumorskih stanica, tipična SAD-u i Velikoj Britaniji za humanih tumora [36]. Pretpostavlja se da je činjenica da p53 genske mutacije koja smanjuje kontrolu nad djelovanjem rasta onkogena samo stvara uvjete za rast tumora. Njihovi su kliničke manifestacije treba očekivati ​​u rasponu do 30 godina, kada je uključen, i druge signale ili oslabiti mehanizme antitumorskom imunitetu.

Mogućnosti IFN-a da spriječe antitumorske procese su neupitne, barem kroz utjecaj na ekspresiju rasta onkogena. Ali uopće nisu proučavani.

U primjeru-myc gena u stanicama Daudi najprije 1984., pokazano je da je tip IFN mogu se promatrati kao negativni regulator rasta ekspresije onkogena koji barem djelomično može objasniti AP-učinak u normalnim tkivima [37]. Kasnije, ovaj efekt je opažen s drugim c-Ha-ras onkogenom rastom. Učinak se češće ostvaruje na razini onkogenog prevođenja (razina proteina). U primjeru koji je prikazan s-myc, DNA-vezujući protein p62 kDa, što je proizvod s-myc, potrebno je za ligaciju fragmenata DNA u jedan spiralni Okazaki. Njegovo suzbijanje nakon uvođenja IFN-a ometa sintezu nove DNA, praćeno inhibicijom proliferacije.

Međutim, druge poznate primjeri supresije replikacije bez značajnijeg utjecaja na ekspresiju protooncogenes rasta (monocitne stanice broj I-937, HL-60, Freund eritroleukemija, Balb c / 3T3). Sustav 2”, 5'-oligo (A) sintetaze-RNaze L može igrati važnu ulogu u tom procesu osiguravanja brzog degradacije mRNA novosintetiziranih potrebnih za proliferaciju [38].

Imunomodulacijsko djelovanje

Za gotovo deset korišteni su IFN pripravci antivirusnim sredstvima koja se mogu zaštititi stanice od virusnih infekcija, bez imunološkog efektora. Iako već nekoliko kliničkih opažanja, kao što su poticanje reparativni procesa u ranama, uključujući i jako zaražena [39, 40] i opsežne opekline [41] nije uklapala u općoj shemi i potrebno novo razumijevanje [2].

Veliko zanimanje je privukla studiju u primata centra u Nizozemskoj, pokazali su da je u majmuna zaraženih vrlo osjetljivi na IFN soja virusa kravljih boginja ili mutant otporan na doze IFN teško dostižan u tijelu (> 10.000. IU), a zatim njihovog IFN liječenje nije bilo značajne razlike u kliničkim dinamike i napetosti koji su se razvili imunitet. U oba slučaja, IFN je spriječio štetu na virusu. On je ukazao na dominantnu ulogu imunoloških efektora aktiviranih INF, u procesu eliminacije virusa i kasnije kliničkog oporavka.

Gledajući unatrag može se reći da je nespecifični aktivacija staničnih imunoloških reakcija i regulaciju efektora imunološkog odgovora, kako se čini - glavna funkcija interferona u organizmu. [4] U interakciji s patogena IFNy produkciji makrofaga i limfocita, je upalna reakcija koja dovodi do uništenja patogena u srcu pri najnižoj normalno tkivo povrijeđeno. Poznato je da se normalne zdravlje održava uglavnom preko ne-specifičnih staničnih imunoloških odgovora u poznatim imunološkim trijade efektora: makrofaga, limfocita i T pomoćne neutrofila fagocitnih. Makrofaga u ovom slučaju vidi se kao univerzalno stanice koje prezentiraju antigen (APC), tvrdi se obrađeni antigen na T stanice, kao i za aktivaciju, citokina. Uloga APC je izveden dendritične stanice i Langerhansovih stanica (kože). Ali bit ovog fenomena se ne mijenja s tim. APC predstavlja obrađeni antigen kompleksirati s glavnog histokompatibilnog kompleksa (MHC) klasa 2 (virusnih i tumorskih antigena u kompleksu s MHC klase 1), koji mora biti prepoznat od strane receptora T stanica (TCR) CLE + limfocita. Poznato je da imunogenost antigena obrađenog porasla je približno 10.000 puta, i 100 antigena + MHC klase 2 u mogućnosti komunicirati sa 18000 TCR [42]. To karakterizira učinkovitost imunog prepoznavanja.

Uloga antigena može se izvesti bilo kojim patogenom koji je prvi put ubijen reakcijama ubijanja peroksida, a zatim se internalizira. Naknadne reakcije nespecifičnog odgovora prikazane su na slici. 1. Pod djelovanjem antigena, makrofag bi trebao biti aktiviran, stvarajući autokrine INF-a i IL-6. Antigeni MHC klase 2 i dalje prisutni na makrofagi ne eksprimiraju se i njihov izgled je stimuliran pomoću IFN-a i IL-4. Proces je potisnut transformacijskim faktorom rasta TGF-a koji također mogu biti proizvedeni makrofagima. Izvor IFN je uvijek aktiviran T limfocitima.

Izravan kontakt makrofaga i limfocita T-pomoćne konstrukcije antigena provodi preko MHC klase 2 + i TCR, koji je dopunjen kao transmembranski glikoproteini ICAM. To osigurava ograničavanje imunološkog odgovora, ali nije dovoljno za aktiviranje T limfocita. Zahtijeva drugi signal kao kompleksne citokina proizvedenog aktivirani makrofagi: to prije svega IFN-a i IL-1, IL-6, IL-12, TNF, koji djeluju zajedno s odgovarajućim receptorom na T pomoćne stanice.

Aktivirane T-pomoćne limfocite, makrofage održavanje oslobođenog u medij, kao što su citokini IFN (poticanje ekspresije MHC klase 2) i IL-4 (za aktivaciju gena MHC klase 1), te zadržavanje LIF MIF makrofage u upalu i kolonije faktora (CSF) - M-CSF i GM-CSF. Zbog međusobnog djelovanja uravnotežen aktiviranih makrofaga i aktivaciju za T pomoćne limfocite stanje održava i pojačanje imunog odgovora postignutom ubrzavanjem diferencijaciju makrofaga rane preteče monocite / makrofage.

Signali aktivaciju makrofaga (IFN, IL-1, TNF, IL-8, G-CSF i GM-CSF) i epitopa T-pomoćnih limfocita (IFN, IL-3), uočenim neutrofilnim fagociti, promoviranje njihovu diferencijaciju, stimuliraju fagocitne funkcija. U tom slučaju, svi parametri povećao fagocitozu - broj zrelih segmentirane neutrofila, stvaranje peroksida, makrofagnog indeks i broj, i (što je najvažnije) cjelovitost fagocitozu. Možeš reći da taj krug zatvara.

Glavni negativni signal za cijeli sustav je IL-10, koji mogu biti proizvedeni od strane makrofaga i T-limfocita. Ali glavna regulatorna uloga u ovom procesu, očito, pripada T limfocitima. Specifična protutijela u ovim reakcijama ne smiju sudjelovati.

Ukupnost staničnih reakcija antigen uklanjanje uključuju makrofaga (ili drugog APC), T-limfociti i polimorfonuklearni fagociti, gdje nema potrebe za proliferaciju i diferencijaciju T limfocita može se smatrati prva faza imunološkog odgovora. Je usko povezana sa sljedećom - u drugoj fazi koja počinje na razini proliferirajućih T-limfocita i određuje glavni smjer u kasnijim reakcijama organizma na štetočinje kada ugrađenom start stanice (naročito DTH), ili humoralnog immunogenesis put.

Prva faza imunološkog odgovora stalno funkcionira i očigledno je glavna neposredna reakcija organizma s niskim opterećenjima patogena. Aktivira se odmah nakon prepoznavanja antigena. Njegovi sudionici su imuni efektori, diferencirani do ovog trenutka, ali s druge strane stvaraju osnovu za kasnije imunološke reakcije. Zaštitna uloga reakcija prve faze imunološkog odgovora iznimno je visoka i očigledno je podcijenjena od strane liječnika.

Prijavite se na svoj račun

Moiseyev, Cand. veterinar. Sciences, LLC "BIOTECH-PHARM", St. Petersburg

JU Baryshnikov, dr. Veteran. Sci., Profesor, Altai State Agrarian University, Barnaul

Obitelj citokina uključuje interferone (dalje - IFN), interleukine, kemokine, faktore stimulacije rasta i kolonije, koji su signalni polipeptidni molekuli imunološkog sustava. Posjedujući široki spektar biološke aktivnosti, oni određuju ne samo adekvatnu razinu imunološkog odgovora, već reguliraju i interakcije glavnih integrativnih sustava tijela - živčani, imuni i endokrini.

Struktura i mehanizam djelovanja većine citokina potpuno su karakterizirani. Zahvaljujući uporabi tehnika genetskog inženjerstva i moderne biotehnologije, mnogi citokini su trenutno proizvedeni u obliku rekombinantnih lijekova identičnih endogenim molekulama, u količini dovoljnoj za njihovu kliničku upotrebu.

Mnogi mikroorganizmi - bakterije, kvasci, virusi - koriste se kao primatelji stranog genetskog materijala radi dobivanja rekombinantnih sojeva - proizvođača biotehnoloških proizvoda. Tako su dobiveni rekombinantni E. coli sojevi koji proizvode interferone, inzulin, hormone rasta, različite antigene; sojevi interferona koji proizvodi interferon B. subtilis; kvasac, proizvodnju interleukina itd.

Korištenje rekombinantnih citokina, koje osiguravaju prikladnu i ciljanu korekciju lijekova imunološkim poremećajima, povećava učinkovitost imunoterapije i liječenja općenito. Ušao u tijelo, citokini ispunjavaju nedostatak endogenih regulatornih molekula i potpuno reproduciraju njihove učinke. To je osobito važno u uvjetima teške ili kronične patologije, kada je korištenje tradicionalnih imunomodulatora ili induktora sinteze citokina beskorisno zbog iscrpljivanja kompenzacijskih sposobnosti imunološkog sustava. Trenutno, rekombinantna terapija citokinom jedno je od najpoželjnijih i sve širenijih područja imunofarmakologije.

Prema tome, antivirusno i antiproliferativno djelovanje djeluje pomoću interferona prvog tipa (u daljnjem tekstu - IFN-a, IFN-β). Posebno mjesto u svjetlu suvremenih ideja o molekularnim mehanizmima imunih odgovora pripada interferonu gama (u daljnjem tekstu: IFN-γ) - regulatorni citokin imunološkog odgovora.

Na temelju rekombinantnih interferona, razne su tvrtke razvile lijekove za životinje i ljude koji se koriste za liječenje i sprečavanje zaraznih bolesti, prvenstveno viralne etiologije.

Rekombinantni IFN kod životinja i ljudi za liječenje i prevenciju bolesti različite etiologije osigurati adekvatan i ciljanog lijeka korekcija imune disfunkcije hranjivih nedovoljnih endogenih molekula regulatornim i razmnožavaju njihove učinke. Visoka efikasnost imobilizacije, predvidljivost i selektivnost njihova djelovanja uvjetovana je prisutnošću specifičnih receptora na stanicama i postojanju prirodnih mehanizama za njihovu eliminaciju. Lijekovi koji se temelje na rekombinantnom IFN-u su moćni agensi patogenetske imuno-orijentirane terapije i imaju izravni učinak supstitucije i različiti induktivni učinci. Trenutno, oni su naširoko koristi u liječenju zaraznih, onkoloških i drugih bolesti životinja.

Razvrstavanje interferona

Interferona (IFN, IFN) - uobičajeno ime pod kojim se sada ukupni broj biološki aktivnih proteina ili glikoproteina koji imaju slična svojstva što se sintetiziraju u stanicama u procesu zaštite reakcije kao odgovor na invaziju stranih sredstava - virusne infekcije ili antigene izloženosti. Zahvaljujući interferonima, stanice postaju imune na virus.

Interferoni su multi-genicna obitelj inducibilnih citokina koji imaju različite funkcije, uključujući antivirusnu, antiproliferativnu, antitumorsku i imunomodulatornu.

Trenutno je poznato više od 20 IFN, koje se razlikuju po strukturi, biološkim svojstvima i prevladavajućem mehanizmu djelovanja. IFN je podijeljen u tri tipa:

• Tip I, poznat i kao virus interferon, uključujući IFN-a (leukocita, sintetizirani pomoću aktiviranih monocita i B-limfocita), IFN-P (fibroblasta sintetiziran pomoću fibroblasta, epitelnih stanica i makrofaga) i drugi IFN. Prvi tip (IFN-a, IFN-β) uglavnom je karakteriziran antivirusnim i antiproliferativnim učincima, u manjoj mjeri - imunomodulacijom. Izrađuju se odmah nakon susreta s patogena - induciranog u procesu virusne infekcije, a njihovo djelovanje je usmjereno na lokalizaciju patogena i spriječiti njegovo širenje u tijelu. Induktori IFN-a i -β su virusi, RNA (osobito dvostruki lanac), lipopolisaharidi (LPS), komponente nekih bakterija. Među virusima, najsnažniji induktori interferona su RNA genomski. Virus koji sadrži DNA je slab induktor (s iznimkom pox virusa).

• Tip II, poznat kao imun, uključuje IFN-γ (sintetiziran aktiviranim T limfocitima i NK stanicama). Glavni učinak interferona drugog tipa (IFN-γ) je sudjelovanje u reakcijama imuniteta. Počinje razvijati senzitizirane T-limfocite u kasnijim fazama procesa infekcije i aktivno sudjeluje u kaskadi specifičnog imunog odgovora. Pokretanje IFN-γ produkcije interferonogenih supstanci, antigeni, T-mitogeni i neki citokini su sposobni. Ciljane stanice za djelovanje IFN-y su makrofagi, neutrofili, prirodnih stanica ubojica, citotoksičnih T limfocita, koji na svojoj površini receptora za proizvodnju IFN-γ-IFN y kontrolira citokina. IL-12 i IL-18 povećavaju njegovu ekspresiju, a IL-2 potiče funkciju CD4 + limfocita, aktivirajući proizvodnju IFN-y. Pozadina broj INF-y je uvijek tu u tijelu, čak i ako postoji infekcija, na primjer, analiza o stanju interferonom pokazuje kod zdravih ljudi i životinja uvijek otkriti iznos IFN u krvi, povećava mnogo puta tijekom stimulacije ili infekcije. Međutim, ako je infekcija herpes virusom, a u posljednje faze količine tumora INF-y teži nuli kao herpes virus i stanice raka proizvesti proteine ​​koji inhibiraju sintezu IFN-y. Stoga, s infekcijom herpes virusom i rakom, induktori interferona su besmisleni, pa ih treba injektirati u tijelo izvana.

• Tip III je otkriven kasnije, tip I i ​​tip II; informacije o tome pokazuju važnost IFN tipa III kod određenih vrsta virusnih infekcija.

Virusne interferona (IFN-α / p) induciran u virusnim infekcijama, a sinteza tip II interferon (IFN-y), mitogeni ili antigene podražaja. Većina vrsta stanica inficiranih virusom može sintetizirati IFN-a / β u kulturi stanica. Nasuprot tome, IFN-γ je sintetiziran samo određene stanice imunog sustava, uključujući prirodne ubojice (NK), CD4 T stanice i citotoksične CDS supresorskih stanica.

Antivirusno djelovanje interferona

Interferoni ne djeluju izravno na virus. Pod njihovim utjecajem stanica postaje otporna na infekciju. Interferoni su prva linija obrane protiv virusne infekcije, jer se počinju proizvoditi odmah nakon izlaganja virusu. U ovom slučaju, težina odgovora je izravno proporcionalna infektivnoj dozi.

Neki virusi mogu blokirati antivirusni učinak IFN-a. Na primjer, adenovirusi proizvode specifičnu RNA koja sprečava aktivaciju protein kinaze.

Vezanje IFN receptora inducira tri istodobna procesa u stanici koja završava:

• aktivacija latentne endorbonukleaze, što dovodi do uništavanja virusne RNA;

• supresija sinteze RNA viralne matrice;

• suzbijanje sinteze proteina virusne omotnice.

Ovi mehanizmi integralno integriraju antivirusni učinak, što dovodi do supresije virusne replikacije.

Imunomodulacijski učinak interferona

IFN posjeduje ne samo antivirusno nego i imunomodulacijsko djelovanje zbog utjecaja na ekspresiju receptora glavnog kompleksa histokompatibilnosti (MHC). IFN povećava ekspresiju MHC klasa I molekula na svim tipovima stanica, čime se poboljšava detekcija zaraženih stanica citotoksičnim T limfocitima (CTL). Osim toga, IFN-γ pojačava ekspresiju molekulske klase 2 MHC na stanicama za predočavanje antigena, čime se poboljšava prezentaciju antigena virusa CD4 + limfociti i prirodne stanice ubojice (NK stanice) su aktivirane. IFN također stimulira fagocitozu.

Regulacija odgovora citokina imunološkim, uključujući i interferona, ide prema naprijed za princip, učinak citokina u stanici da uzrokuje stvaranje drugih citokina (citokina kaskadnim).

Antiproliferativni učinak interferona

Antiproliferativni učinak IFN-a objašnjen je slijedećim mehanizmima:

• aktiviranje citotoksičnih stanica;

• povećana ekspresija antigena povezanih s tumorom;

• modulacija proizvodnje antitijela;

• inhibicija faktora rasta tumora;

• inhibicija sinteze RNA i proteina tumorske stanice;

• usporavanje staničnog ciklusa s prijelazom na fazu mirovanja;

• poticanje tumorskih stanica za sazrijevanje;

• obnova odvraćanja kontrole proliferacije;

• inhibicija stvaranja novih žila u tumoru;

• biomodulacija citostatske aktivnosti: promjene u metabolizmu i smanjenje klirensa;

• prevladavanje otpornosti na lijekove inhibicijom gena za rezistenciju na više lijekova.

Antibakterijski učinak interferona

Posljednjih godina pokazalo se da IFN također ima antibakterijski učinak koji se temelji na sposobnosti IFN-a da inducira aktivnost određenih enzima u zahvaćenom stanici.

Osim toga, antibakterijska uloga IFN-y je aktiviranje makrofaga koji proizvode proinflamatorne citokine, kao i aktivne oblike kisika i dušika, prostaglandina. Ti čimbenici pridonose razvoju upalnog procesa koji dovodi do smrti bakterija.

Dakle, svi interferoni su skupina polifunkcionalnih faktora proteina s izraženim antivirusnim i antitumornim učinkom različitih stupnjeva. IFN-a ima najjaču antivirusnu aktivnost među svim interferonima, a IFN-γ ima izraženije antiproliferativno djelovanje. Svi interferoni imaju imunoregulacijske učinke različite težine (maksimalno posjeduje IFN-γ) - povećavaju aktivnost makrofaga, T-limfocita i NK stanica.