Lažno pozitivan PCR rezultat

Simptomi

Naše prednosti:

  • jeftino prima liječnika od 900 rubalja
  • hitno Analizira se dan liječenja od 20 minuta do 1 dan
  • blizu 5 minuta od metro stanice Varshavskaya i Chistye Prudy
  • udobno svakodnevno radimo od 9 do 21 svaki dan (uključujući blagdane)
  • Anonimno!

Lančana reakcija polimeraze možda je jedna od najosjetljivijih i najpreciznijih metoda dijagnosticiranja različitih infektivnih bolesti, osobito one koje se seksualno prenose. Određivanje čak i male količine DNA čestica bakterija, virusa, gljivica, PCR je prilično specifična metoda, što rijetko daje lažne pozitivne rezultate.

Lažni pozitivni rezultat znači da zapravo nema infekcije, a reakcija je pozitivna.

No, čak i sa 98-99% točnosti, ponekad PCR-ovi također imaju netočne odgovore koji gotovo nikada nisu povezani sa samim odgovorom, već više kršenjima u preliminarnoj fazi.

Razlozi lažnog pozitivnog rezultata PCR analize su:

  • Rok za provođenje kontrolnih testova nakon liječenja seksualnih infekcija nije održan. Činjenica je da su većina infekcija unutar stanica ili fiksirana na površini njihovih membrana. Tijekom potpunog liječenja, uzročno-posljedični agens STI propada, ali čestice njegovog genoma (DNA) ostaju neko vrijeme u organizmu domaćina. Potrebno je oko 3 tjedna da ove stanice budu zamijenjene novima koji nisu stupili u vezu s infektivnim sredstvom, a zatim se uzima kontrola. Ako uzmemo analizu prije, zbog svoje visoke osjetljivosti, PCR otkriti DNK već mrtve bakterije i ukazuje na prisutnost patogena, koji će biti neistinit, jer je infekcija već umro.
    Naši liječnici imaju dovoljno znanja iz područja dijagnostike spolno prenosivih bolesti i starenja, pa su takve situacije u klinici privatnoj praksi isključene.
  • DNK spolno prenosivih infekcija ulazi u testnu cijev iz ruku venerologa, od rukavica i uroloških sondi.
    Taj je faktor isključen, jer se za uzimanje materijala upotrebljavaju samo rukavice za jednokratnu upotrebu, ispitne cijevi i sonde.
  • Izuzetno je rijetko imati lažne pozitivne rezultate ukoliko postoji blisko povezani mikroorganizam u strugalima. To jest, analizator daje prisutnost patogenih bakterija koja uzrokuje bolest venerina, ali zapravo ona je sastavnica normalne mikroflore. Ali taj je problem dugo bio riješen uvođenjem suvremenijih i specifičnih sustava ispitivanja.
  • DNA ili onečišćenje ulaska u infekcijama cijevi u laboratorijskoj fazi istraživanja bio je kada je to moguće, ali praktično isključena pravilnu organizaciju procesa dijagnoze i obuku.

U svakom slučaju, dijagnoza se uvijek vrši ne samo na temelju rezultata jedne analize. Konačna dijagnoza spolno prenosivih bolesti kombinacija je reklamacija, kliničkog pregleda i kombinacije različitih laboratorijskih i instrumentalnih metoda.

Ako urolog, ginekolog ili venerolog pojavljuju sumnje u ispravnost rezultata PCR otkrila neslaganje ili postojeće kliničke i laboratorijske dijagnostičke podatke jedni s drugima, liječnik uvijek preporučiti daljnje ispitivanje pomoću ELISA metode NASBA, kultura, kako bi se razjasniti situaciju.

U našim klinikama postoje sve dostupne metode moderne medicine za ispitivanje muškaraca i žena. Stoga se isključuje izrada lažnih dijagnoza STI.

Liječnik klinike "Privatna praksa" dermatovenereologist, urolist Volokhov EA govori o analizi PCR za infekciju.

Medicinski centar na Chistiye Prudy i Varshavka

Prijem u našim klinikama svakodnevno od 9.00 do 21.00

U SAD i SWAD - metro Varshavskaya, Kakhovskaya, Sevastopol - st. Bolotnikovskaja kuća 5 zgrada 2, tel. 8-499-317-29-72

U centru (CAO) - metro Chistye Prudy, Turgenevskaja, Lubyanka - Krivokolenny staza 10 stranica 9, tel. 8-495-980-13-16

STD testovi

Došli ste kod ginekologa s pritužbama na iscjedak. Kako bi se odredio uzročnik infekcije i izabrao pravilan tretman, liječnik propisuje testove. Što i kojim redoslijedom?

1. bacterioscopy (razmazati na flori). Uzima se nakon umetanja vaginalnog zrcala, pod kontrolom oka, pomoću jednokratne lopatice (plastična šipka s povećanim krajem). Ako ste se brinuli o sebi u besplatnoj medicini i unijeli sa sobom jednokratnu opremu za ginekološki pregled, ušla je lopatica. Neispravno je uzorkovanje materijala za razmazivanje rukavicom (jer talka, koja je obrađivala rukavice, može iskriviti sliku); ogledalo (ponekad, uzimajući zrcalo, liječnik prenosi dodjelu na staklo), tk. u osnovi se pomiču izbrisane stanice sa stražnjeg svoda vagine; Nakon istrage dvije ruke bez umetanja ogledalo (kao što je materijal, moraju se obaviti pod nadzorom oka, odnosno vidjeti da li se). Uzimanje mrlje je druga manipulacija liječnika nakon što ste na naslonjaču, prvo je uvođenje vaginalnog zrcala. Zatim je svjetlost usmjerena na ogledalo, a liječnik uzima viđenje žličice materijal, poželjno je od tri dijela, ali barem dva od potonje: vanjski otvor mokraćne cijevi, vagine i grlića maternice. Tek nakon toga moguće je izvršiti naprednu kolposkopiju (bojenje cerviksa s otopinama) i dvodijelni pregled. Ovaj postupak se objašnjava činjenicom da su rješenja koja se koristi za kolposkopije, ubijaju bakterije, čineći razmaz smisla, a ako je s dvije ruke studija mikrotravmirovanie grlića maternice površina, premazati pad odljuštenih stanica, krvnih zrnaca, te sprečavaju dijagnozu infekcije. Materijal preuzet spatula ravnomjerno se raspršuje preko jasnog klizača širokim kistom. Pogrešno je nanijeti materijal u debeli sloj, kap, mali udar - tako da će laboratorijski liječnik biti puno teže obavljati svoj posao. Materijal iz različitih dijelova odvojeno smještenih na staklo, stražnja strana označena staklo mjesto štapić: „U” - uretre, „C” - vrata maternice, „V” - vagina. Nakon toga, staklo se osuši u zraku i šalje u laboratorij.

U laboratoriju se mrlja oboji i pregleda mikroskopom.

Što laboratorijski tehničar može vidjeti:

a) Epitel. Stanice koje pokrivaju vaginu i cerviks. Obično bi trebao biti prisutan. Njihov broj varira ovisno o fazi menstrualnog ciklusa, korištenih hormonalnih lijekova. Više ženskih spolnih hormona (srednji ciklus, unos estrogena, trudnoća), više epitela. Odsutnost epitelnih stanica može govoriti o atrofiji epitela, nedostatku estrogena, višak muških spolnih hormona.

b) Leukociti. Stanice koje obavljaju zaštitnu funkciju, "jedu" uzročnice infekcija. S upalom u vagini (kolitis, vaginitis) njihova se količina povećava razmjerno njegovoj težini i broju patogena. Normalno, broj leukocita u prvoj fazi menstrualnog ciklusa je do 10 u vidnom polju (područje stakla vidljivo pod mikroskopom), u drugom - 10-15 u vidnom polju. Povišene razine leukocita dovoljne su za utvrđivanje činjenice infekcije, ali nisu dovoljne za određivanje njegovog patogena. Patogen je pronađen vrlo poželjan kako bi pravilno odabrao antibiotike.

c) Rodna flora (morfotlak laktobacila). To je normalna flora (mikroorganizmi koji moraju živjeti u kiselom okolišu vagine), osim što ništa ne bi trebalo otkriti u smearu.

Ukupno, prikazano u nastavku, u normalnom moždanom udaru ne smije biti:

g) Koka. Bakterije su sferične u obliku (za razliku od štapića). Ponekad je izgled dovoljno je postaviti dijagnozu (diplococci (parovima) - gonoreja, set koka, malih palicama i „ključ” stanica - bakterijska vaginoza), ponekad točna dijagnoza zahtijeva sijanje.

d. Mali štapić. Najčešći anaerobni (ne koristi kisik) bakterije, gardnerele. Znak bilo infekcije ili vaginalne dysbiosis, pogotovo kada ih ima više od laktobacila.

e. "Ključne" stanice. Stanice epitela, "caked" s malom štapom. Simptom bakterijske vaginoze - vaginalno dysbacteriosis - stanje u kojem je aerobni umjesto (kislorodolyubivoy) mliječnih bakterija umnožiti u vagini anaerobnih organizama, uključujući i male šipke.

Pa. Gljive. Kandidijaza patogena (duda). Ovisno o jačini procesa, mogu se pojaviti gljivične spore (neobjašnjiva kandidijaza, eventualno bez manifestacija), hifa, micelij gljiva (uobičajena kandidijaza).

h. Trichomonas. Cijela ili uništena. Uzbudljivači trichomoniasis. Veliki jednostanični organizmi s flagellom.

Otkrivanje "g" stavki u testu pomaže kod utvrđivanja uzročnika agresije i odabira odgovarajućih antibiotika. Međutim, možete se susresti s situacijom u kojoj, pored bijelih krvnih zrnaca u krpom, nema ništa više nije otkrivena. razlozi:

a). Definicija patogena zahtijeva više kvalifikacija laboratorijskog asistenta nego prisutnost leukocita.

b). Virusna, mikoplazmatska, klamidijska infekcija. Ti mikroorganizmi su tako mali da nisu vidljivi u mikroskopu. Za njihovu dijagnozu koriste se i druge metode.

c). Previše leukocitoze, kada njihov broj ima više od 100 na polju gledišta (ponekad laboratorijski radnici pišu "leukociti pokrivaju sva vidna polja"). To znači da materijal sadrži mrlje koji sadrži samo uništene stanice i leukocite, gnoj. Patogeni koji otkrivaju gljivice gotovo nikada ne uspijevaju.

g). Neispravno prikupljanje materijala (vidi gore).

To je slučaj kada se izmet zabrinjava, liječnik priznaje da je mrlja loša i trebate se liječiti, ali ništa se ne nađe, a nije jasno što se tretira. Ovdje postoje 3 opcije:

a) ako postoji sumnja u točnost uzimanja materijala i kvalifikacije laboratorijskog pomoćnika, ponovo nanesite mrlju

b) Ako nema sumnje - predajte materijal za sjetvu ili PCR dijagnostiku. Ove su metode osjetljivije. Potonji vam omogućuje otkrivanje virusa, klamidije, mikoplazama.

c) ako "bijele krvne stanice u potpunosti pokrivaju sva polja" - imenuje univerzalni terapeutski režim, tj. skup antibiotika širokog spektra koji utječe na sve moguće bakterije. Ako to ne dovede do potpunog oporavka, tada barem smanjuje broj bijelih krvnih stanica, što vam omogućuje da uzmete materijal za daljnje traženje patogena.

Bakterijska biokemijska otopina obavlja se u roku od jednog dana, s uobičajenom bojom u obliku metilen plave boje - u roku od 15 minuta.

Kvaliteta premaza i rezultata ovise prije svega o ispravnosti uzimanja materijala, sekundarno na kvalifikaciji laboratorija. Učinkovitost liječenja, osim toga, ovisi i o poznavanju ginekologa koji propisuje režim liječenja.

2. Bakteriološka studija (sjetva, metoda kulture). Uzgoj bakterija na hranjivim medijima. Metoda je mnogo osjetljivija od mikroskopije, jer omogućava otkrivanje patogena pri niskoj koncentraciji, kada ne padne u razmaz. Analiza se ponovno uzima nakon umetanja ogledala, pod kontrolom oka iz cervikalnog kanala s posebnim sterilnim tamponom. Kada otvori jednokratnu epruvetu s tamponom (zapečaćena je tvorničkom metodom) i bez dodirivanja, umetnite tampon u cervikalni kanal. Jedan pokret i bez dodirivanja tampona se vraća u epruvetu i čvrsto se zatvori. Najvažnija stvar pri uzimanju materijala za inokulaciju je sterilnost, tako da bakterije dolaze s područja koja se istražuje, a ne iz zraka, kože itd.

U laboratoriju, voda od ispiranja se odnose na mediju za kulturu (ili želatinske-agar agar), na kojoj se bakterije rastu. Obični usjevi se proizvode s pristupom zraku, tj. Anaerobne (bez kisika) bakterija ne mogu rasti. Njihova sjetva je također moguća, ali ovo je posebna studija koja se ne radi u svim laboratorijima. Za rast virusa (herpes), klamidija također zahtijeva posebne uvjete i okolinu (kao što je ovaj intracelularni paraziti, oni ne mogu rasti samo na hranjive tvari koje su im potrebne kulturu živih stanica. Dakle, u normalnoj sjetvi ne može otkriti prisutnost klamidija) je zasebna analize.

Kulturna metoda (bakteriološka, ​​bacteriosus) je tzv. "zlatni standard" dijagnoze mnogih infekcija i glavni način praćenja učinkovitosti liječenja. Mnogo je osjetljiviji i specifičniji (vidi dolje) uobičajeni razmaz i ima prednost u odnosu na DNA-dijagnostiku (PCR). Činjenica je da je važno da ne pronađete mikrob, već da dokazujete da je on taj koji uzrokuje infekciju, a to nije ista stvar. U tijelu često postoje mikroorganizmi, tzv. „Uvjetno patogeni” (npr, Gardnerella), koji se obično ne uzrokuju bolesti, ali s padom imuniteta, razvoj dysbiosis - može uzrokovati. Njihovo otkrivanje ne dokazuje svoju ulogu u razvoju infekcije. No, njihov rast na hranjivim medijima kaže da su, kao prvo, održiv (može rasti i uzrokovati bolest), a kao drugo, brojne (neki mikrobi je potisnut od strane onih koji su više, a potom u mediju raste ne infektivni agens, ali normalna flora). Još jedna prednost bakteriološkog istraživanja je da vam omogućuje da izračuna broj pokretača (broj kolonija), te utvrditi osjetljivost na antibiotike (u medij kulture dodaju različite antibiotike i gledati s lijekom bakterije su ubijeni). Jedini nedostatak metode je trajanje njegovog izvođenja (bakterija raste nekoliko dana) i zahtjevanost u laboratoriju.

3. DNA-dijagnostika (PCR). DNK dijagnostika uključuje nekoliko metoda, no najčešće je lančana reakcija polimeraze (PCR). Ovo je otkrivanje DNA materijala patogena. DNA je molekula u kojoj su sve informacije o ćeliji zatvorene. U stanicama organizama jedne vrste (na primjer, mycoplasma genital), određena područja DNA su ista. Stoga, poznavanje strukture tih područja u glavnim patogenima, možete stvoriti zrcalne kopije koje će pronaći i komunicirati s njima. Pronalaženje čak i jedne takve stranice je dovoljno kako bi se osiguralo da je PCR pozitivan. To ukazuje na iznimno visoku osjetljivost metode.

Metoda je dobra za dijagnosticiranje infekcija koje se ne mogu detektirati u razmazima: klamidija, genitalni herpes. Međutim, kako bi se utvrdilo učinkovitost liječenja iste bolesti, metoda je neprihvatljiva, jer i nakon propadanja stanica u tijelu mogu ostati dijelovi DNA. Samo održivi reprodukcijski mikroorganizmi mogu poslužiti kao znak ne-izlječenja, a mogu se otkriti samo sjetvom. Međutim, nisu dostupne sve metode. Intracelularni paraziti u normalnom sjetvu se ne može odrediti, a ako ne čine poseban bakteriološka ispitivanja na kulturama stanica u laboratoriju - mora biti zadovoljan s PCR - onda to treba uzeti najranije 3-4 tjedna nakon tretmana

Također je nepoželjno koristiti PCR metodu dijagnosticirati gardnerelleza, jer ove su bakterije također normalno sadržane u vagini. Oni ne bi smjeli biti u testu, a u ovom slučaju, bakteriskopija je dovoljna metoda za dijagnozu gardnerelleza i kontrolu liječenja. A DNA tih bakterija može i treba biti, nije kriterij bolesti.

Pozitivan rezultat PCR na ureaplazmi (biovar) i mikoplazmu nije kriterij dijagnoze i liječenja - vidi članak Mycoplasma i ureaplasma

Materijal za PCR se uzima iz cervikalnog kanala, ponekad iz vanjskog otvora uretre posebnim sterilnim jednokratnim četkom. Prije uzimanja materijala, sluz i pražnjenje s pamučnim brisanjem uvijek se uklanjaju, nepoštivanje ovog pravila često dovodi do lažnih rezultata. Većina ispitivanih organizama - intracelularni paraziti, tako da je njihovo otkrivanje zahtijeva struganje stanice, umjesto izolacije, koji sprečavaju pristup epitela. Zatim se materijal s četke stavlja u spremnik s otopinom soli, koja se prije analize mora pohraniti u hladnjak. Glavna stvar je poštivanje sterilnosti.

Razlozi pogrešnih rezultata PCR-a:

1. nepoštivanje pravila o unosu materijala - uklanjanje sluzi iz cervikalnog kanala. Najčešći razlog. Ne možete ga kontrolirati. Jedino što možete učiniti je odabrati ginekologa za koju vjerujete.

2. nepoštivanje pravila PCR-a u laboratoriju. Zbog toga što i vi ne možete kontrolirati, leži na savjesti laboratorija.

3. Opet nepravilnost uzimanje materijala - materijal uzimajući u DNA bakterija iz zraka, s njim, pokrov staklo (često nekako materijal će PCR kao konvencionalni brisa na staklu To nije u redu, jer se staklo ne može biti sterilna.). Sterilnost se može kršiti u laboratoriju, ako će stranci često hodati oko radnog uzorka i "sipati" različite DNK od svoje odjeće. I ti nećeš to provjeriti.

Stoga, unatoč činjenici da je PCR najosjetljivija i specifična dijagnostička metoda, ima svoje nedostatke. Rezultati bi trebali analizirati liječnik, uzimajući u obzir mogućnost svih gore navedenih. Dijagnoza se temelji na pritužbama i simptomima. Bilo koja dijagnostička metoda je izborna, ne može se 100% osloniti na.

4. Određivanje protutijela u krvi (serološka metoda) - najčešće pomoću ELISA (enzimski imunoanaliza).. Dodatni dijagnostička metoda za razlikovanje akutne bolesti, njegove prve epizode akutne egzacerbacije kronične infekcije. Pogotovo ova metoda se često koristi u drugom stanju nakon otkrivanja uzročnika PCR za određivanje vjerojatnosti infekcije djeteta. Najopasniji za tijelo, a najčešće se prenosi na dijete je primarna infekcija (prvi hit patogena), kada je imunološki sustav još nije susreo s mikroorganizmima i nema iskustvo da se s njima nositi. Kao odgovor na patogene ulaska u krv formirana antitijela - tvari koje se vežu na njih i pokušati da se povuče iz tijela. Uz primarnu infekciju proizvodi se antitijela iste klase. Imunoglobulini M. Njihova prisutnost u krvi pokazuje da je tijelo bolestan te je indikacija za liječenje infekcije. Kasnije počinje proizvoditi druge antitijela - imunoglobulina G Oni se spremaju, a nakon tretmana, neke infekcije (kao što rubeole) - zauvijek. Pronalaženje imunoglobulina u krvi G kaže da je tijelo prethodno sastao s infekcijom i razvio imunitet protiv toga, to je dobar znak, jer ne zahtijeva liječenje. Istodobna prisutnost obje klase imunoglobulina ukazuje na pogoršanje kronične infekcije i zahtijeva liječenje. Kada se samo sumnja imunoglobulina G i infekcija (znakovi infekcije fetusa), nakon 2 tjedna radi ponovljene analize s definicijom titra (iznosu) protutijela. Oštar porast titra (4 puta) ukazuje na aktivaciju infekcije i zahtijeva liječenje.

Određivanje antitijela u krvi glavnim uzročnicima (toksoplazma, rubeola, citomegalovirus, herpes) u trudnica se zove Bakljama kompleksa. Za sve ove infekcije, vrlo je važno je li žena prije bila bolesna, tj. ako ima imunoglobuline u njezinoj krvi, ako ne, tada postoji mogućnost razvoja primarne infekcije tijekom trudnoće i oštećenja fetusa. U tom slučaju, trebate biti oprezniji od mogućih infekcija i redovito provjeravati sadržaj protutijela.

Antitijela na herpes. Najčešće, ako ne i naznačeno na miru obliku - antitijela na HSV1 i HSV 2 (i ne obvezuju da će udvostručiti cijenu) - iskrvario utvrditi mješovite antitijela na obje vrste virusa. I kao herpes tip 1, skoro smo svi bili bolesni kao dijete, 98% odrasle populacije ima antitijela na njega, a analiza je pozitivna, čak i ako nikada nisu imali genitalni herpes. Stoga ova analiza gotovo nema vrijednost i može uštedjeti novac. Jedini znak - ste trudni i mislite da je tip 1 herpes (groznica na usnama) nikad imao. Zatim provesti tu analizu, i ako zaista ne postoje antitijela u principu, to je više potrebno da bi se zaštitili od moguće infekcije, čak i ovi „bezopasna” herpes tip 1, jer i njegova primarna infekcija može oštetiti fetus. (Moskva ima laboratorije koje čine antitijela na HSV tip 2, bez antitijela na HSV tip 1, ali zbog visoke cijene uvoznih reagensa takvim analizama - rijetki).

Za određivanje protutijela, krv se uzima iz vena. Opet ovisi o razini laboratorija i kvaliteti reagensa.

Osjetljivost metode - broj pozitivnih rezultata (otkrivene bakterije) u prisutnosti patogena u materijalu. Osjetljivost 80% znači da u 80% slučajeva prisutnosti bakterija u materijalu, ova metoda će im omogućiti otkrivanje.

Specifičnost metode - vjerojatnost da je pozitivan rezultat istinit. Specifičnost od 80% znači da je u takvoj uzročnici u 80% pozitivnih rezultata ispitivanja stvarno prisutan. Preostalih 20% pozitivnih testova zapravo su lažno pozitivni.

Lažno pozitivan rezultat - situacija u kojoj je rezultat analize pozitivan (otkriva se bakterija), ali zapravo nije. Što je veća osjetljivost i manja specifičnost metode, veća je vjerojatnost lažnih pozitivnih rezultata. Za pacijenta, lažni pozitivni rezultat znači nepotrebnu anksioznost, potragu za preljubom (tko je inficiran) i neopravdanom liječenju.

Posebno je nepoželjno primiti lažno pozitivan rezultat nakon tretmana. Bio je liječen i tretiran, ali klamidija je ostala. Znači, pogrešno se liječi? Ili je partner još zaražen? Ili se prenose kućnim sredstvima? Ovo je najčešći od ginekoloških pitanja poslanih na web mjestu. Glavni razlog je da su korištene iste vrlo osjetljive metode (na primjer, PCR) za kontrolu učinkovitosti liječenja kao i za primarnu dijagnozu. Jedna nesretna, dugotrajna DNA molekula iz uništene stanice klamidije može biti uhvaćena i dati lažno pozitivan rezultat, ali ne i klamidiju. Dakle, "zlatni standard" za ponovnu analizu nakon tretmana je sjetva. Ako je infekcija poražena, definitivno neće rasti.

Lažni negativni rezultat - negativan rezultat analize (ne pojavljivanje patogena) kada je prisutan u tijelu. Pojavljuje se kada se koriste metode niske osjetljivosti (bakterioskopija). Za pacijenta je neugodno za nužnost ponavljanja isporuke plaćenih analiza.

Metode za borbu protiv lažnih rezultata:

1. Tražite kvalificiranog laboratorija i ginekologa

2. Odabir prave metode dijagnoze za određenu situaciju i poštivanje pravila za analizu.

3. Liječenje simptoma, a ne rezultati ispitivanja. Moderan PCR proizvodi dovoljan broj lažnih pozitivnih rezultata. Za komercijalne centre ovo je vrlo vrijedna značajka metode. No, kompetentni pacijent ne bi trebao biti u mogućnosti liječiti njegove testove. Vrlo česta situacija - "otišao je ispitati, pronašao ureaplazmu, što da radim?" Tretirajte što vas smeta. Ako ništa drugo, neizbježno prijevoz određenih neopasnim i nebespokoyaschih mikroorganizama (Ureaplasma, Mycoplasma, Gardnerella, jednom candida, HPV, herpes, CMV) ne zahtijeva liječenje, a u slučaju pronalaska apsolutnu patogen (gonococcus, klamidija, Trichomonas) analize ponovnog uzimanja, uključujući druge metode - i kada se potvrdi dijagnoza, provodi se liječenje.

Jesu li PCR pogreške moguće? Lažno negativne i lažno pozitivne PCR rezultate

Za primanje lažnih rezultata u PCR dijagnozi - i lažno pozitivni i lažno negativni - mogu biti podložni različitim okolnostima.

Upotreba postupka lančane reakcije polimeraze (PCR) zahtijeva najstrože poštivanje svih faza analize počevši od analize analize od strane liječnika do tumačenja rezultata analize. Koliko je informativna PCR analiza ovisi o mnogim okolnostima.

  • Lažno pozitivan rezultat analize može proizaći iz ulaska u materijal (mrlje ili struganje uretre) krvi.
  • Slični lažno pozitivni rezultati PCR analize dobiveni su zbog nepostojanja epitelnih stanica u materijalu, ali u sadržaju velike količine potpuno neinformativne sluzi.
  • Primitak lažnih rezultata analize DNA utječe nepravilnim transportom i skladištenjem dobivenih uzoraka. DNA infekcija u ovom slučaju može biti uništena i kao posljedica - lažni negativni rezultat.
  • Poremećaji sterilnosti tijekom PCR dijagnostike još su jedan od razloga za lažno pozitivno PCR. U prikupljenom materijalu pacijenta strane bakterije mogu ući iz ruku liječnika, od odjeće, od stakla ili kontaminiranog alata do reusabilnih posuđa. Kao rezultat toga, pronađena je "nepostojeća" infekcija.
  • Neodgovarajuće reagensi. Neometan i neaktivan laboratorij u kojem liječnici "zatvore oči" zbog nepriznavanja reagensa je još jedan i ozbiljan razlog za nepouzdanu dijagnozu. Naravno, to značajno smanjuje troškove laboratorijske dijagnostike, ali ne može utjecati na rezultate.

U nastojanju da se izbjegne takve pogreške, liječnici Medicinskog centra „Evromedprestizh” vrlo ozbiljan pristup provedbi laboratorijske dijagnostike: koristiti samo za jednokratnu upotrebu materijala u svim fazama analize, u skladu s potrebnim mjerama za održavanje potpune sterilnosti laboratorija i ordinacije. Imamo samo najvišu kategoriju liječnika i iskusnih laboratorija koji redovito poboljšavaju svoje kvalifikacije kako ne bi liječili nepostojeće bolesti, ali da bi dobili pouzdane rezultate.

Kada je moguć lažni pozitivni test za sifilis

Analiza definicije sifilisa nužna je za osobe koje bi trebale skoro sve od njih: zapošljavanje, liječničke preglede, preventivne preglede, trudnoću. Provedba ovih studija je neophodna - omogućavaju prepoznavanje bolesti u ranoj fazi, kada će liječenje imati najveću učinkovitost.

Dobiveni pozitivni rezultat često stavlja osobu na slijepu stranu, osobito u nedostatku bilo kakvih razloga. Otkrivanje sifilisa lažno pozitivan je prilično česta pojava, pa stoga nemojte paničariti rano. Prema informacijama iz različitih izvora, do 30% primarnih studija može proizvesti pogrešan rezultat. Mnogo je razloga za taj fenomen: promjenu stanja tijela, somatske bolesti. Da bi bolje razumjeli zašto se pojavljuju, vrijedi pažljivo razumjeti pitanje istraživanja.

Vrste testova za sifilis

Metode kliničkih istraživanja brzo se poboljšavaju svake godine. S razvojem novih metoda dijagnoze, lažno pozitivna reakcija na sifilis manje je i manje uobičajena. Ako je potrebno, dijagnoza može uključivati ​​nekoliko različitih metoda - to vam omogućuje da dobijete najpouzdaniji rezultat.

Ne-treponemal metode istraživanja

Ove tehnike su usmjerene na identificiranje proteina koji nastaju kao rezultat aktivnosti blijedih spiroheta. Cilj im je odrediti "tragove" patogena. Takve metode imaju relativno visoku postotnu pogrešku (do 10%). Takve tehnike nisu nespecifične, ali omogućuju titar protutijela da određuju stupanj infekcije.

Wassermannova reakcija RW

Najčešća analiza, koja se provodi za prepoznavanje blijedog treponema, je serološki pregled krvi. Reakcija Wassermana omogućuje nam da odredimo prisutnost bolesti u samo nekoliko minuta. Stoga se ova tehnika najčešće koristi u laboratorijima - to ne zahtjeva puno vremena i ima relativno niske troškove.

Spinalna tekućina ili krv koriste se za izvođenje analize. Materijal za uzimanje uzoraka može se uzeti iz prsta (ako je samo jedan analiziran) ili iz vena (ako je potrebno nekoliko studija). Kao rezultat analize može biti ne samo lažno pozitivno, već i lažno negativno. Moguće je u sljedećim okolnostima:

  • ranoj fazi infekcije, kada je količina treponema u tijelu još uvijek niska;
  • kronična bolest u fazi remisije, kada se broj antitijela smanjuje.

Obratite pažnju! Lažno negativan rezultat nastaje vrlo rijetko, pa stoga, ako postoji najmanje jedan plus od četiri, potrebno je dodatno ispitati.

Mikro-otkrivanje recikliranja (MR)

Ova metoda istraživanja temelji se na reakciji antigena i antitijela. To zahtijeva malu količinu materijala za izvođenje. Namjera je otkriti antilipidna antitijela, koja se proizvode u procesu uništavanja stanica treponemom. Za studiju koriste se i krv pacijenta i cerebrospinalna tekućina.

Budući da se uništavanje stanica može pojaviti ne samo kod sifilisa, analiza se koristi kao screening, a ne potvrda. Postoje dva analogna ove tehnike:

  • Mikroskopski test (VDRL). Za izvođenje analize koristi se inaktivirani krvni serum. Ako postoji sumnja na lezije živčanog sustava sifilisom, kao testni materijal koristi se leđna tekućina.
  • Makroskopski test (RPR). Smatra se metodom ekspresne dijagnostike. Koriste se vizualni izračun reaktanata plazme.

Ova reakcija, ako se ne poštuje neophodna sterilnost, može pokazati lažno pozitivan rezultat. Pojava takve analize je također moguća s nespecifičnim oštećenjem tkiva, što podrazumijeva uništavanje lipida. Ako postoji pozitivan rezultat, obavezno test treponemala preporučuje se za potvrdu.

Treponemal metode istraživanja

Ova kategorija analiza daje najtočnije podatke i rijetko su netočni pozitivni rezultati. Studije su usmjerene na identificiranje specifičnih proteina koje tijelo oslobađa kao odgovor na infekciju. Ove metode imaju veći trošak i stoga se koriste kao potvrde, a ne kvalifikacije.

Pojedinačna antitijela počinju proizvoditi tijelo tek nekoliko tjedana nakon infekcije s treponemom. Oni mogu trajati dulje vrijeme kako bi liječili bolest. Stoga, specifični testovi mogu pokazati pozitivne rezultate dugo nakon remisije.

Obratite pažnju! S pozitivnim RW i negativnim specifičnim, ponovno se provodi studija nakon nekoliko tjedana.

Analiza imunoenzima (ELISA, EIA)

Temelji se na procjeni razine IgA, IgB i IgM imunoglobulina. Prve dvije vrste proteina se proizvode u tijelu od 2 tjedna infekcije, a IgM - mjesec dana nakon infekcije.

Tumačenje analize provodi se na temelju omjera prisutnosti imunoglobulina:

  • Pronađeno je samo IgA - proteklo je više od 14 dana od infekcije;
  • IgA i IgB infekcije su otkrivene od prije 14 do 28 dana;
  • pronašao sve tri vrste - sifilis u tijelu više od 28 dana;
  • Pronađeno je samo IgM - kasni sifilis.

Prisutnost IgM može biti znak već izlječenog sifilisa - sinteza imunoglobulina IgM može nastaviti nekoliko mjeseci nakon remisije.

Reakcija imunofluorescencije (RIF, FTA)

Koristi se za potvrdu infekcije u najranijim fazama. Za istraživanje, krv se uzima iz prsta ili vene. Rezultat je sličan analizi RW, gdje je naznačeno minus, ili od 1 do 4 plusa. Ako postoji barem jedan plus, može se dodijeliti dodatna studija.

Izuzetno je rijetko pronaći lažne pozitivne rezultate pri obavljanju RIF-a - oni mogu biti u trudnica, kao i kod bolesnika s bolestima vezivnog tkiva.

Reakcija pasivne aglutinacije (TPHA, TPHA)

Titar protutijela omogućava određivanje prisutnosti sifilisa i njegove faze. Pouzdani podaci ove tehnike daju već 28 dana nakon infekcije. Za procjenu se koristi krv iz prsta ili vene. Povećanje broja antitijela znači kasniji stupanj bolesti.

Najtočnije metode istraživanja

Analize ove grupe su vrlo osjetljive, pa je pogreška u njihovim rezultatima izuzetno niska. Oni se razlikuju po višoj cijeni, u usporedbi s drugim metodama, i sofisticiranijom tehnikom implementacije.

Lančana reakcija polimeraze (PCR)

PCR analiza se smatra jednim od najpreciznijih. Cilj je odrediti područja patogene DNA u ljudskom tijelu. Metoda zahtijeva specijaliziranu opremu i reagense, pa se stoga koristi u rijetkim slučajevima.

Imunoblotting

Kombinirana metoda istraživanja. Cilj mu je određivanje imunoglobulina u krvnom serumu pacijenta. U analizi se provjerava prisutnost kompleksa antitijela prema kojoj je uspostavljena dijagnoza. U ovoj se tehnici koristi elektroforeza s kojim se razdvajaju imunodeterminanti i ELISA test koji pokazuje odvojene točke.

Reakcija imobilizacije blijedih treponema (RIBT)

Vrlo specifična analiza koja određuje odgovor krvnog seruma na blijedu treponemiju. Široko se koristi u cijelom svijetu, jer ima visoku vjerojatnost točnog rezultata. Posebna antitijela (imunomobilizinzija) kod bolesnika sifilisa mogu imobilizirati treponem. U krvi zdrave osobe nema takvih protutijela. Na prisutnosti / odsutnosti ove sposobnosti temelji se istraživačka metodologija.

RIBT se upotrebljava za identifikaciju tih sorti sifilisa u kojima Wassermanova reakcija proizvodi negativne rezultate - poraz živčanog sustava, unutarnjih organa, latentni oblik bolesti. Lažno pozitivan rezultat u zemljama ZND-a iznimno je rijedak. Uzrok njegovog pojavljivanja može biti sarkoidoza, guba.

Uzroci lažnih pozitivnih rezultata

Wassermanova reakcija može odrediti "akutne" i "kronične" lažno pozitivne rezultate. Njegova težina ovisi o prirodi promjena u ljudskom stanju. Stupanj pogoršanja RW može se pokazati u takvim slučajevima:

  • zarazne bolesti u fazi egzacerbacije;
  • traumatskih ozljeda;
  • infarkt miokarda;
  • uvođenje bilo kojeg cjepiva nekoliko dana prije testa;
  • trovanje hranom.

Ovi uvjeti karakteriziraju povećani rad imunološkog sustava, što dovodi do povećane proizvodnje antitijela. Oni su pogrešno prepoznati u reakciji kao protutijela na treponemu, pa stoga dolazi do pozitivnog rezultata.

U prisutnosti patologija kronične prirode, imunološki sustav proizvodi veliki broj nespecifičnih protutijela koja mogu izazvati reakciju. U RW-u, ovo stanje može pokazati lažno pozitivan rezultat. Stoga je vrijedno upozoriti liječnika o sljedećim bolestima:

  • kronična patologija vezivnog tkiva;
  • tuberkuloze;
  • kronične bolesti virusne etiologije: HIV, hepatitis B, C, D;
  • kronična bolest jetre;
  • autoimune patologije.

S godinama u pacijentovom tijelu, redoks reakcije usporavaju. Tkiva starenja mogu također pokazati lažno pozitivan rezultat, pa stoga stariji pacijenti imaju određene metode istraživanja.

Obratite pažnju! Uz pozitivnu Wassermanovu reakciju provodi se dodatna studija koja omogućuje precizniju sliku.

Pregledajte ponovo

Ponovljeni test za sifilis se provodi s upitnim rezultatima probira. Postavljen je s jednim ili dva križa - ova analiza zahtijeva dodatnu provjeru. Studija može dati lažne pozitivne rezultate u nekoliko slučajeva:

  • Rani stupanj bolesti. Prije pojave čvrste šanke, količina imunoglobulina u tijelu je dovoljno niska.
  • Kasni stupanj bolesti. Od infekcije je prošlo više od 2 godine, a titar protutijela postupno se smanjivao.

Ponovljena analiza, koja se provodi nakon 2-3 tjedna, pokazuje točno postoji li bolest. Ako je drugi put pozitivan rezultat, koriste se dodatne tehnike razjašnjavanja.

Testovi trudnoće

Jedan od najneočekivanijih može biti pozitivan rezultat ispitivanja za sifilis kod trudnica, pogotovo ako žena nije promijenila partnera. Ova situacija često zastrašuje buduće majke, budući da treponema može negativno utjecati na intrauterini razvoj bebe.

Probira za trudnoću se obavlja više puta:

  • kada se registrira, u 12 tjedana;
  • početak trećeg trimestra, na 30 tjedana;
  • prije rođenja.

Ovo je količina istraživanja koja se smatra minimalnim. Lažno pozitivna analiza sifilisa može se očitovati zbog restrukturiranja tijela koja se javlja tijekom trudnoće. Kada žena nosi dijete, njezin imunološki sustav proizvodi veliki broj protutijela - evolucijski uređaj koji štiti bebu u prvoj godini života.

Tijekom trudnoće propisana je dodatna analiza dorade, koju karakterizira veća preciznost. Ako kontrolna studija pokazuje prisutnost nekog agensa u tijelu, liječenje je obavezno. Učinak terapije na rastući organizam je znatno manji od mogućih šteta od treponema.

Kako se pripremiti za analizu?

Jedan od načina sprečavanja pogrešnog rezultata je priprema za isporuku testova. Zbog neprikladne pripreme mogu se pojaviti reakcije koje su popraćene proizvodnjom nespecifičnih protutijela, što dovodi do pojave netočnog rezultata.

  • Analiza se mora poduzeti na prazan želudac. Možete koristiti samo čistu vodu.
  • Dan prije uzorkovanja krvi nužno je potpuno eliminirati alkohol - to stvara dodatni teret na jetru, što može dovesti do pojave pozitivnog rezultata.
  • Preporuča se uoči odbijanja da jede masnu i prženu hranu, začinjeno jelo i veliki broj začina.
  • Najmanje 60 minuta prije analize, preporuča se da se suzdržite od pušenja.
  • Prije uzimanja krvi iz vena, morate se odmarati 10-15 minuta u odjelu za primanje.
  • Žene se ne preporučuju za davanje krvi tijekom menstruacije.
  • Nemoguće je provesti analizu nakon rendgenskog pregleda, postupaka fizioterapije.
  • Zabranjeno je donirati krv za sifilis tijekom pogoršanja zaraznih bolesti.

Obratite pažnju! Ako pacijent uzima bilo koji lijek, prije testiranja se mora posavjetovati s liječnikom, može potrajati nekoliko dana između uzimanja lijekova i analize.

Što da radim ako imam sifilis?

Ne brinite se za dobivanje primarnog probiranja s pozitivnim rezultatima. Lažno sifilis se lako može odrediti ponavljanim pregledom. Ako je dijagnoza potvrđena, potrebno je poduzeti sljedeće mjere:

  • pregled seksualnog partnera u dermatovenerologu;
  • ispitivanje bliskih srodnika;
  • provedba preventivnog liječenja, kako bi se spriječila infekcija s rodbinom;
  • registracija bolovanja za vrijeme liječenja - bolnički list ne sadrži podatke o dijagnozi, jamči povjerljivost;
  • na kraju tijeka liječenja izdaje se poseban certifikat - trebate ga imati s vama kako biste izbjegli pitanja o lažnim pozitivnim rezultatima u narednih nekoliko mjeseci.

Pozitivan rezultat za sifilis nije uvijek pouzdan. Stoga se ne brinite i preporuča se pričekati dodatna istraživanja. Pravilno liječenje, koje je započelo na vrijeme, jamči brzi oporavak uz minimalne rezidualne učinke.

Jesu li PCR pogreške moguće? Lažno negativne i lažno pozitivne PCR rezultate

Dijelite nove informacije u:

Primanje lažnih rezultata u PCR dijagnostici - I lažni pozitivni i lažno negativni - mogu utjecati na različite okolnosti.

Upotreba postupka lančane reakcije polimeraze (PCR) zahtijeva najstrože poštivanje svih faze analize, počevši od analize uzorkaliječnik prije tumačenja rezultata analize. Koliko je informativna PCR analiza ovisi o mnogim okolnostima.

  • Lažno pozitivan rezultat analize može proizlaziti iz ulaska u materijal (mrlje ili struganje uretre) krv.
  • Slični lažno pozitivni rezultati PCR analize dobiveni su zbog nepostojanja epitelnih stanica u materijalu, ali u sadržaju velike količine potpuno neinformativne sluzi.
  • Primitak lažnih rezultata analize DNA utječe nepravilnim transportom i skladištenjem dobivenih uzoraka. DNA infekcija u ovom slučaju može biti uništena i kao posljedica - lažni negativni rezultat.
  • Poremećaji sterilnosti tijekom PCR dijagnostike još su jedan od razloga za lažno pozitivno PCR. U prikupljenom materijalu pacijenta strane bakterije mogu ući iz ruku liječnika, od odjeće, od stakla ili kontaminiranog alata do reusabilnih posuđa. Kao rezultat toga, pronađena je "nepostojeća" infekcija.
  • Neodgovarajuće reagensi. Neometan i neaktivan laboratorij u kojem liječnici "zatvore oči" zbog nepriznavanja reagensa je još jedan i ozbiljan razlog za nepouzdanu dijagnozu. Naravno, ovo je vrlo jeftino laboratorijska dijagnostika, ali ne može utjecati na njezine rezultate.

Podijelite nove informacije s prijateljima i poznanicima u:

Vaša pitanja

Pitanje: Koliko je točna PCR dijagnoza?

Koja je točnost PCR dijagnostike?


točnost PCR (lančana reakcija polimeraze) dijagnoza u određenim infekcijama kreće se od 99 do 100 posto.
Izuzetno je rijetka PCR daje lažno negativne rezultate i, u praksi, ne daje lažne pozitivne rezultate. Lažni negativni rezultat je kada analiza pokazuje odsutnost patogenog mikroorganizma (izvor infekcije), onda kada je zapravo.
To se može dogoditi kada:

  • Biološki materijal je pogrešno odabran. Na primjer, kada infekcija citomegalovirus ispituje urin (ne umak od grla ili krvi) ili dijagnoza infekcije središnjeg živčanog sustava (središnji živčani sustav) umjesto cerebrospinalne tekućine, koristi se krv.
  • Pravila za prikupljanje biomaterijala nisu poštivana. Ako je neka osoba podvrgnuta antibiotskoj terapiji tijekom PCR testova, uzeo je uroptike i antivirusne lijekove. Slično tome, lažno negativni testovi mogu biti, ako prije isporuke moždani udar pacijent ili urin pomokrio, imali spolni odnos prije ili uzimanje lijekova u obliku vaginalnih čepića (svijeće).
  • Istražen je izvor infekcije, koji je tijekom svoje vitalne aktivnosti podložan promjenama. U srcu bilo kojeg mikroorganizma je sposobnost promjene. Neki virusi mogu steći varijabilnost na razini DNA (deoksiribonukleinska kiselina). Na primjer, virus influence ima veliku sposobnost "mutirati" i mijenjati svoje genetske informacije. Dakle, PCR ne može otkriti izvor infekcije, budući da genom (agregat gena) bili su podložni promjenama.

Lažno pozitivan rezultat (analiza pokazuje prisutnost infekcije kada nije prisutna) nije tipična za PCR dijagnostiku i nalazi se samo u onim slučajevima kada je infekcija već "mrtva", ali mrtve stanice cirkuliraju u tijelu. Nemogućnost razlikovanja "mrtve" infekcije i aktivnog (živo) infekcija je jedan od nedostataka PCR metode. U slučaju da osoba već ima određenu infekciju (bolest je tretirana i ubijena antibakterijskim ili antivirusnim sredstvima), PCR analiza i dalje će dati pozitivan rezultat patogenim mikroorganizmima, čak i ako je već "mrtav".

PCR analiza, PCR dijagnostika infekcija

Srećom, živimo u potpuno drugačijem vremenu, kada mogućnosti dijagnoze nisu neograničene, ali su vrlo velike. Sada, kako bi se utvrdilo rezultate opće analize krvi, laboratorijska liječnici ne morate potrošiti mnogo vremena, provedite ga na mikroskop, a zatim ispunite pažljivo obliku; Dovoljno je staviti ispitnu epruvetu u posebnu napravu nekoliko sekundi, koja će sami dati željene rezultate u tiskanom obliku. Dakle, s drugim studijama. Na primjer, sada svaka infekcija, čak i potajno curenje, može se identificirati "replicirajući" uzorak materijala s kopijama njegove DNK. Ova nevjerojatna tehnika, koja je postala sasvim obična za nas, naziva se PCR, što znači "lančana reakcija polimeraze".

Temelj metode

Objasniti bit PCR dijagnostike je prilično jednostavna, iako se složeni procesi pojavljuju tijekom izvođenja.

Metoda se temelji na identifikaciji DNK infektivnog agensa, bilo da je riječ o virusu, bakteriji ili najjednostavnijem. Ako materijal pacijenta sadrži barem minimalnu količinu DNK, barem tragovima prisutnosti mikroba u njoj, test će dati pozitivan rezultat.

Za PCR analizu, uzorak krvi (ili razmazivanje, struganje ili nešto drugo) stavlja se u poseban aparat, pri čemu se dodaju enzimi koji imaju sposobnost utjecanja na genetički materijal. Ti enzimi "pronalaze" fragmente DNA i na njihovo reproduciraju veliki broj točnih kopija. Na temelju jednog fragmenta mogu se izraditi tisuće analoga, što povećava ukupni volumen genetskog materijala patogena u uzorku.

Nakon toga, DNA se detektira posebnim uzorcima usmjerenim na otkrivanje antigena raznih patogena.

PCR-om ne samo da može dati odgovor na pitanje da li osoba ima određenu bolest, ali u nekim slučajevima kvantificirati otprilike odrediti koliko klice su u tijelu pacijenta (to odražava ozbiljnost i stadij bolesti - ili pogoršanjem otpust),

Dijagnoza koje su moguće infekcije PCR-om?

Ako je potrebno, možete izvesti PCR dijagnostiku od nekoliko desetaka različitih infekcija, ali je većina "relevantnih" nekoliko od njih navedenih u nastavku. Osobito je važno PCR kada je potrebno identificirati skrivene zarazne bolesti, u kojima klice koje ulaze u tijelo i razvijaju se u njima ne uzrokuju nikakve simptome, nego štetno zdravlju i izazivaju komplikacije. Budući da se u većini slučajeva latentna infekcija razlikuje od spolne infekcije, PCR je najvažnija u definiciji spolno prenosivih bolesti.

Očito je da neke bolesti mogu odmah uzrokovati nekoliko vrsta jednog roda mikroba ili nekoliko sojeva iste vrste. U takvim slučajevima, PCR je u stanju detaljno odrediti koji patogen uzrokuje patološki proces.

Dakle, metoda lančane reakcije polimeraze koristi se za dijagnozu sljedećih bolesti i kada su otkriveni sljedeći patogeni:

- virusni hepatitis (virus hepatitisa B i C);

-mikoplazmoza (Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium);

- ureaplazmoza (Ureaplasma urealiticum, Ureaplasma parvum);

- Klamidija (Chlamydia trachomatis);

- Candidiasis (Candida albicans);

- trichomoniasis (Trichomonas vaginalis);

- tuberkuloza (mycobacterium tuberculosis);

- herpes (herpes simplex virusi od 1,2 vrste);

-Helicobacter pylori (bakterija povezana s kroničnim gastritisom i peptički ulkus bolest);

- ljudski papilomavirus, uključujući onkogene serotipove;

- virus humane imunodeficijencije;

PCR i lažnih pozitivnih rezultata

Metoda lančane reakcije polimeraze je vrlo precizna, ali to nije samo njegova najvažnija prednost nego i problem. Činjenica je da ponekad s PTSR-om postoje lažni pozitivni rezultati.

Iz tog razloga, u nekim bolestima, beskorisno je obavljati PCR dijagnostiku. Na primjer, postoji takav poremećaj kao i gardnerellez ili bakterijska vaginoza. Kada se pojavi kod žena, postoji kršenje vaginalne mikroflore, previše aktivna reprodukcija nekih komponenata flore, naime, bakterija-gardnerella. Ako su ove bakterije rijetke, njihova prisutnost ne uzrokuje simptome, ali ako su prisutni u prevelikim količinama pojavljuju se upale, svrbež i iscjedak pojavljuju.

Ako napravite zdrave žene i bolesnika s vaginozom klasična PCR analiza, tada će u oba slučaja doći pozitivan rezultat. Istraživanje ne "uzima u obzir" da gardnerele mogu biti i u normi, ona ih u svakom slučaju prepoznaje kao "neprijatelje". U tim slučajevima primjenjujemo kvantitativnu analizu, koju ćemo raspravljati u nastavku.

Isto tako, ponekad se određuje lažno pozitivno PCR, ako se umjesto "štetnih" mikrobioloških vrsta određene vrste nalazi "bezopasno" u materijalu.

Unatoč nekoj vjerojatnosti lažnih rezultata, općenito, PCR dijagnostika je vrlo precizna; osim toga, s vremenom se poboljšava njegova tehnologija pa možda u budućnosti može zaboraviti i problem lažnih pozitivnih rezultata. Ali, do sada, nažalost, mogućnost njihova pribavljanja mora se imati na umu.

Nadamo se da te informacije neće dovesti do činjenice da ćete izgubiti povjerenje u metodologiju. Općenito, mnogo je pouzdaniji od mnogih drugih testova. Konkretno, mnogo puta je manje vjerojatno da će dati lažno negativne rezultate, koji su vrlo karakteristični za ne manje popularnu analizu ELISA. Ipak, svjesno je Cary Mullis, "otkrivač" PCR-a, postao vlasnik Nobelove nagrade...

PCR analiza

Za provođenje dijagnostike PCR-a mogu se uzeti različite vrste materijala, ali u nekim bolestima, u pravilu se uzimaju uzorci u kojima je najlakše otkriti patogena.

Infekcije penetriranje u krvi (npr, virusni hepatitis i HIV) zahtijevaju prikupljanje krvi, većina genitalnih infekcija koje žive u odgovarajućim mjestima identificirane u studiji o vaginalnom razmazu, cervikalni kanal ili uretre. Intracelularni patogeni spolno prenosivih bolesti, na primjer, mikoplazma, određuju se tijekom ispitivanja struganja iz genitalnog trakta. Ponekad je za dijagnozu moguće uzimati urin, sline, mrlje iz grla.

Bilo koji materijal se uzima u redoslijedu definiranim standardnim pravilima.

Krv je izvučena iz krvi na prazan želudac, dan prije svoje ograde potrebno je odbiti od unosa masne hrane i alergene hrane. Prvi jutarnji urin prikuplja se u sterilnim posudama nakon preliminarnog perineum WC-a i upućuje se u laboratorij. Da bi se razmazila iz vagine, pacijent se nalazi na ginekološkoj stolici, a stručnjak sa sterilnim instrumentom uzima uzorak iz željenog područja. Kod muškaraca, premazivanje ili struganje na STD se uzima s vanjske strane uretre. Kako je rečeno, kako se mrlje iz ždrijela poduzimaju, očigledno nije nužno - u djetinjstvu je svaka osoba prošla ili je održala ovaj jednostavan postupak neko vrijeme.

Nakon faze uzorkovanja, pacijent ne smije razmišljati o svojoj budućoj sudbini: uzorak, uz sva potrebna pravila skladištenja i transporta, bit će isporučen u laboratorij, gdje će se pregledati. Nažalost, PCR se ne može nazvati brzom metodom dijagnoze, proizvodnja rezultata može potrajati nekoliko dana, u prosjeku - tjedan dana. Međutim, to nije ograničenje maksimalnog trajanja proizvodnje rezultata analize. Na primjer, kako bi se provela bakteriološka studija za tuberkulozu, treba čekati mjesec dana - Kochovi štapići ne mogu rasti brže od kolonije.

Dekodiranje PCR rezultata

U najjednostavnijim slučajevima, rezultati analize ne moraju se dugo razmotriti, budući da se izdaje na izuzetno razumljiv način: zapisi su "na negativnoj" ili "pozitivni" na tiskanom obliku. Ako je rezultat PCR-a negativan, pacijent može biti siguran da u njegovom tijelu nema znakova infekcije, za koje je traženje poslano u analizu. Pozitivan PCR test vjerojatno će ukazivati ​​na suprotnu situaciju, iako se, kao što je gore spomenuto, u rijetkim slučajevima može doći do lažnih pozitivnih rezultata.

Postoji neka vrsta lančane reakcije polimeraze, poput PCR u realnom vremenu. Ova analiza određuje ne samo prisutnost genetskog materijala patogena u uzorku, već i njegov kvantitativni sadržaj, što omogućuje iznošenje još točnijih zaključaka o postojećoj bolesti. U ovom slučaju, rezultati istraživanja dani su na slikama. Pacijentica ih ne uspijeva ispravno dešifrirati, tako da konačni zaključci o tome da li osoba pati od infekcije treba napraviti liječnik, ovisno o DNA titru u uzorku materijala.

Trenutačno, PCR analiza je jedan od najpouzdanijih laboratorijskih testova koje može obavljati samo pacijent. Međutim, to ne znači da od sada, ako sumnjate na bilo kakvu infekciju, trebali biste se prijaviti samo na ovu vrstu dijagnoze. Za određene bolesti postoje poželjne metode istraživanja, stoga je bolje konzultirati stručnjaka kako biste predložili koja se analiza najbolje rabi u svakom slučaju.